[发明专利]一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法

权利要求书

1.一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1：提取铁皮石斛多糖；

S2：采用热溶剂法合成氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN-NH₂：先制备树枝状介孔纳米颗粒unDMSN，然后通过后接枝方法对其进行氨基修饰，得到DMSN-NH₂；

S3：铁皮石斛多糖的纯化：将步骤S2制得的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN-NH₂超声溶解在孵育溶液中，然后加入步骤S1提取的铁皮石斛多糖样品，利用旋转培养混合器振荡吸附至少3小时后，离心收集吸附了铁皮石斛多糖的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN-NH₂，然后用10％SDS洗涤三次，再用蒸馏水洗涤沉淀，用滤纸吸附多余的液体；接着加入70％的乙醇溶液置于25℃恒温摇床以150rpm振荡解吸24h，4000rpm离心15min，取上清，得到纯化后的铁皮石斛多糖。

2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S1包括以下步骤：

S1a：将铁皮石斛原药材，除去杂质后剪成小段，50℃烘干，打粉，过筛备用；

S1b：称取铁皮石斛药材粉末和蒸馏水混合，然后采用回流提取法对铁皮石斛多糖进行提取。

3.根据权利要求2所述的纯化方法，其特征在于：步骤S1b中，所述铁皮石斛药材粉末和蒸馏水的质量比为1:100，提取次数为2次，提取时间为1.5h。

4.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S2包括以下步骤：

S2a：制备树枝状介孔纳米颗粒unDMSN：将TEA加入去离子水中并于80℃的油浴锅搅拌30分钟，然后添加CTAB和NaSal，继续搅拌1h后，滴加TEOS到上述混合的溶液中，在80℃下继续搅拌4h；反应结束后，通过9000rpm离心10min收集所得产物，并用乙醇和水洗涤各洗两次以除去残留的反应物；随后，将获得的沉淀物用HCl和乙醇的混合溶液在80℃下萃取两次以除去残留的有机模板，最后在50℃下真空干燥12h得到白色固体样品，即树枝状介孔纳米颗粒unDMSN；

S2b：将步骤S2a制得的树枝状介孔纳米颗粒unDMSN分散在乙醇中在超声处理10min后，继续搅拌15min，然后在剧烈搅拌下将氨水、去离子水和APTES加入上述溶液中，继续剧烈搅拌12h，最后将最终产物用乙醇洗涤，并在50℃真空中干燥8h以上。

5.根据权利要求4所述的纯化方法，其特征在于：步骤S2a中，TEA、去离子水、CTAB、NaSal、TEOS的用量比例为0.68g:25mL:0.38g:0.168g:4mL。

6.根据权利要求4所述的纯化方法，其特征在于：步骤S2a中，所述HCl和乙醇的混合溶液中HCl和乙醇的体积比为1:9。

7.根据权利要求4所述的纯化方法，其特征在于：步骤S2a中，沉淀物用HCl和乙醇的混合溶液在80℃下萃取两次，每次萃取24h。

8.根据权利要求4所述的纯化方法，其特征在于：步骤S2b中，树枝状介孔纳米颗粒DMSN、乙醇、氨水、去离子水、APTES的用量比例为500mg:100mL:2.5mL:2.5mL:1mL。

9.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S3中，氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN-NH₂和孵育溶液的用量比为40mg:30mL。

10.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于：步骤S3中，所述孵育溶液为去离子水。