[发明专利]一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法

说明书

本发明公开了一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，包括以下步骤：S1：提取铁皮石斛多糖；S2：采用热溶剂法合成氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN‑NH₂；S3：铁皮石斛多糖的纯化：将氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN‑NH₂超声溶解在孵育溶液中，然后加入步骤S1提取的铁皮石斛多糖样品，利用旋转培养混合器振荡吸附至少3小时后，离心收集吸附了铁皮石斛多糖的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN‑NH₂，然后用10％SDS洗涤三次，再用蒸馏水洗涤沉淀，用滤纸吸附多余的液体；再加入70％的乙醇溶液振荡解吸24h，4000rpm离心15min，取上清，得到纯化后的铁皮石斛多糖。本发明的纯化方法工艺简单，可实现高效、环保、经济地富集分离铁皮石斛多糖。

技术领域

本发明属于铁皮石斛多糖纯化技术领域，具体涉及一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法。

背景技术

铁皮石斛作为一种传统名贵的中药材，是一种具有高药用价值的食用植物，其主要活性成分有多糖、生物碱、类黄酮、多酚、微量元素和氨基酸等，其中多糖含量最高，2020版《中国药典》记载铁皮石斛中多糖含量不低于25％。铁皮石斛多糖具有降血糖、护肝、抑菌、抗肿瘤、抗骨质疏松、保护肠胃、抗氧化和增强免疫力等功效。

铁皮石斛作为一种天然产物，其有效成分复杂而且含量低，难于富集，如何从复杂的天然产物中纯化和分离有效成分，是当前加快天然产物应用进程的一个重要问题。用传统的分离方法，例如大孔树脂，硅胶柱色谱等方法，这些方法虽然工艺简单，但是溶剂用量大、污染严重、耗时耗能、经济成本高，对于一些结构和性质相近的成分难以实现有效的分离。现有的铁皮石斛多糖分离方法，存在步骤繁琐，多糖得率低、损失严重的问题，因此，寻找高效、环保且低成本的铁皮石斛多糖纯化方法便成为关键。目前，本领域中仍然缺乏对铁皮石斛多糖进行富集分离、对其有效成分进行分离纯化的方法。

发明内容

本发明的一个目的是针对以上要解决的技术问题，提供一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，其可以高效、环保、经济地实现铁皮石斛多糖的富集分离，同时可以为中药有效成分的富集分离方法的研究提供技术启示。

为了实现以上发明目的，本发明提供了一种基于氨基化树枝状纳米介孔材料的铁皮石斛多糖纯化方法，包括以下步骤：

S1：提取铁皮石斛多糖；

S2：采用热溶剂法合成氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN-NH₂：先制备树枝状介孔纳米颗粒unDMSN，然后通过后接枝方法对其进行氨基修饰，得到DMSN-NH₂；

S3：铁皮石斛多糖的纯化：将步骤S2制得的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN-NH₂超声溶解在孵育溶液中，然后加入步骤S1提取的铁皮石斛多糖样品，利用旋转培养混合器振荡吸附至少3小时后，离心收集吸附了铁皮石斛多糖的氨基化树枝状纳米介孔材料DMSN-NH₂，然后用10％SDS洗涤三次，再用蒸馏水洗涤沉淀，用滤纸吸附多余的液体；接着加入70％的乙醇溶液置于25℃恒温摇床以150rpm振荡解吸24h，4000rpm离心15min，取上清，得到纯化后的铁皮石斛多糖。

相比于现有技术，本发明采用热溶剂法合成树枝状介孔材料DMSN-NH₂，然后利用树枝状介孔材料DMSN-NH₂对铁皮石斛多糖类化合物的良好的吸附和解吸性能，实现对铁皮石斛多糖的纯化，使铁皮石斛多糖含量由最初的6.55％,分别提高到51.14％。本发明的铁皮石斛多糖纯化方法工艺简单，可实现高效、环保、经济地富集分离铁皮石斛多糖，且该纯化方法有望为食品产业中含糖物质的富集分离提供新思路。

优选地，步骤S1包括以下步骤：

S1a：将铁皮石斛原药材，除去杂质后剪成小段，50℃烘干，打粉，过筛备用；