[发明专利]引导多能干细胞成为发育停滞的细胞的方法及应用在审
申请号: | 202111267797.8 | 申请日: | 2021-10-29 |
公开(公告)号: | CN113930386A | 公开(公告)日: | 2022-01-14 |
发明(设计)人: | 陈国凯;周小晓 | 申请(专利权)人: | 澳门大学 |
主分类号: | C12N5/0735 | 分类号: | C12N5/0735;C12N5/074 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 陈秋梦 |
地址: | 中国澳门氹*** | 国省代码: | 澳门;82 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 引导 多能 干细胞 成为 发育 停滞 细胞 方法 应用 | ||
1.一种引导多能干细胞成为发育停滞的细胞的方法,其特征在于,包括:在培养多能干细胞的培养基中加入rapamycin。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述rapamycin在培养基中的浓度为20-200nM;优选为50-100nM。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述多能干细胞为人多能干细胞。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述人多能干细胞选自人类胚胎干细胞或人类诱导多能干细胞。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述人多能干细胞的培养是在添加有rapamycin的E8培养基中进行培养的。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述E8培养基的成分包括DMEM/F12培养基、L-抗坏血酸-2-磷酸镁、硒酸钠、转铁蛋白、胰岛素、碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,在所述E8培养基中,L-抗坏血酸-2-磷酸镁的浓度为60-70mg/L,硒酸钠的浓度为12-16μg/L,转铁蛋白的浓度为8-12mg/L,胰岛素的浓度为18-22mg/L,碱性成纤维细胞生长因子的浓度为90-110μg/L,转化生长因子-β的浓度为1-3μg/L。
8.一种获取多能干细胞的方法,其特征在于,其采用权利要求1-7中任一项所述的方法引导多能干细胞成为发育停滞的细胞。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,停止培养之后,采用培养基将得到的细胞进行润洗。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,采用E8培养基对得到的细胞润洗至少2次。
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