[发明专利]合成N-乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌及其应用

权利要求书

1.一种合成N-乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌，其为含有氨基葡萄糖合成酶基因glmS、氨基葡萄糖转乙酰基酶基因gna1和6p-乙酰氨糖特异性的磷酸酶基因yqaB的重组谷氨酸棒状杆菌。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述氨基葡萄糖合成酶基因glmS来源于枯草芽孢杆菌168，所述氨基葡萄糖转乙酰基酶基因gna1来源于秀丽隐杆线虫，所述6p-乙酰氨糖特异性的磷酸酶基因yqaB来源于大肠杆菌K12。

3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌还包含在氨基葡萄糖转乙酰基酶基因gna1前插入的融合标签，所述融合标签包括HA、CMYC、Flag和STREPII中的一种或几种，优选为HA。

4.根据权利要求2或3所述的基因工程菌，其特征在于，来源于枯草芽孢杆菌168的氨基葡萄糖合成酶基因glmS，来源于秀丽隐杆线虫的氨基葡萄糖转乙酰基酶基因gna1，以及来源于大肠杆菌K12的6p-乙酰氨糖特异性的磷酸酶基因yqaB均进行了密码子优化。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的基因工程菌，其特征在于，所述合成N-乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌为经过底盘微生物改造的合成N-乙酰氨基葡萄糖的基因工程菌。

6.根据权利要求4所述的基因工程菌，其特征在于，所述底盘微生物改造包括GlcNAc逆转运途径、分解代谢途径的相关基因的敲除，以及竞争代谢途径相关基因的敲除或弱化。

7.根据权利要求6所述的基因工程菌，其特征在于，所述GlcNAc逆转运途径的相关基因包括胞外GlcNAc转运至胞内的GlcNAc特异性磷酸转移酶基因cgl2642；和/或，所述GlcNAc分解代谢途径的相关基因包括乙酰氨基葡萄糖分解代谢途径的6p-GlcNAc脱乙酰酶基因nagA和6p-GlcN脱氨基酶基因nagB；和/或，所述竞争代谢途径相关基因包括副产物乳酸合成途径的基因ldh、甘露糖途径的相关基因、磷酸戊糖途径的相关基因和糖酵解途径相关基因。

8.根据权利要求1-7中任意一项所述的基因工程菌在合成N-乙酰氨基葡萄糖中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，将所述基因工程菌进行发酵培养，制备N-乙酰氨基葡萄糖；优选地，发酵诱导条件为：葡萄糖添加浓度为60-100g/L，进一步优选为80-100g/L；和/或，玉米浆添加浓度为8-18g/L，进一步优选为16-18g/L；和/或，IPTG诱导剂添加时间为发酵2-14小时，优选为2-5小时，进一步优选为2-3小时。