[发明专利]荔枝转基因体系的构建方法及其应用

权利要求书

1.一种荔枝转基因体系的构建方法，包括以下步骤：

步骤a：荔枝种子消毒后于无菌培养基中培养获得荔枝实生苗；

步骤b：活化农杆菌得到侵染用农杆菌菌液，所述农杆菌中携带有目的基因；

步骤c：使用注射器吸取所述农杆菌菌液创伤侵染荔枝实生苗的茎，然后避光静置；

步骤d：恢复培养后荔枝实生苗上获得到转基因根；

其中，所述农杆菌中含有筛选质粒；所述筛选质粒中含有报告基因RUBY；所述报告基因RUBY由35S启动子引导表达，所述农杆菌为Ar.Qual发根农杆菌。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述无菌培养基为1/2 MS培养基。

3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述荔枝实生苗是指苗期为20-30天的荔枝实生苗。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述步骤b具体为：将含有目的基因的农杆菌加入TY液体培养基，于28℃振荡培养2小时，离心重悬后，将菌液涂布在含有链霉素、卡那霉素的TY固体培养基上，28℃培养2天，挑单菌落于含有链霉素、卡那霉素和乙酰丁香酮的TY液体培养基中，28℃、220 rmp振荡培养得到侵染用农杆菌菌液。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述农杆菌菌液的OD₆₀₀值为0.5-0.7。

6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤d中恢复培养的环境条件为：温度24-26℃，暗培养8 h，光照培养16 h。

7.权利要求1-6任一项所述的构建方法在荔枝品种选育及荔枝品种改良中的应用。