[发明专利]一种低温起爆有机肥菌株诱变优化方法及菌剂复配工艺

权利要求书

1.一种低温起爆有机肥菌株诱变优化方法及菌剂复配工艺，其特征在于，包括菌株诱变优化方法如下：

S1：菌株的筛选，所述的菌种包括特基拉芽孢杆菌GSICC30298、特基拉芽孢杆菌GSICC32846、蜡样芽孢杆菌GSICC30299、苏云金芽孢杆菌GSICC32845、贝莱斯芽孢杆菌GSICC32847；

S2：细菌培养基，细菌培养基包括胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、蒸馏水1000mL，pH至7.0，在120℃-130℃高压蒸汽灭菌20-30min；

S3：寡营养培养基，寡营养培养基为细菌培养基稀释5倍；

S4：12C6+离子束注入诱变，将S1筛选的菌株于S2的细菌培养基中振荡培养至对数期，吸取1.5ml菌液至一次性培养皿中，经过辐照设备进行辐照处理，12C6+离子束注入辐照后的菌液诱变，12C6+离子束注入LET为60KeV，辐照剂量分别为40Gy、80Gy、120Gy、160Gy、200Gy、240Gy；

S5：突变菌株的筛选，取S4中不同辐照剂量12C6+离子束诱变处理后的菌液，分别梯度稀释至10-5、10-6、10-7三个梯度，分别吸取0.1mL的三个梯度的菌液，添加到S3中寡营养培养基平板上均匀涂布，5℃倒置培养5d，挑取培养基上长势较好的菌落，纯化后保存待用；

S6：突变菌株生长性能测定，分别取S5中的突变菌株的菌落种于细菌培养基中，37℃振荡培养48h，采用分光光度计法测定OD600值，在相同培养条件下为对照，生长速度最快的突变菌株为贝莱斯芽孢杆菌突变株和蜡样芽孢杆菌突变株。

2.根据权利要求1所述的一种低温起爆有机肥菌株诱变优化方法及菌剂复配工艺，其特征在于：所述的S4步骤中的辐照设备为兰州重离子研究装置。

3.根据权利要求1所述的一种低温起爆有机肥菌株诱变优化方法及菌剂复配工艺，其特征在于：所述的S1步骤中的特基拉芽孢杆菌GSICC30298、特基拉芽孢杆菌GSICC32846、苏云金芽孢杆菌GSICC32845、S6步骤中的贝莱斯芽孢杆菌突变株和蜡样芽孢杆菌突变株在S2步骤中的细菌培养基中扩大培养，直至各菌株的有效活菌数为5×10⁸CFU/mL，将扩大培养的菌剂按体积比混合均匀，得到生物有机肥菌剂。