[发明专利]一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法

权利要求书

1.一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：所述保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法包括如下步骤：

(1)材料准备，准备活性纤连蛋白溶液、多张钛金属板和基板，使用工具对钛金属板表面冲孔，基板一侧表面设置有多个插槽，将多张冲孔钛金属板分别插入到插槽中，得到载体钛金属组合；

(2)载体消毒，使用专用消毒液对载体钛金属组合进行超声波清洗，然后使用热风机充分干燥后备用；

(3)制备硅烷化载体，将活化载体钛金属组合加入到碱液中充分反应，再将3-氨丙基-三乙氧基硅烷(APTES)对钛表面进行硅烷化改性，使用紫外光辐照技术在钛表面构建甲基丙烯酸酰化明胶涂层，得到涂层载体钛金属；

(4)纤连蛋白固化，将涂层载体钛金属加入到活性纤连蛋白溶液中反应30min～60min，倒去多余液体，然后使用缓冲液冲洗未结合的纤连蛋白，得到固化纤连蛋白载体钛金属；

(5)低温储存，向固化纤连蛋白载体钛金属中加入储存液，然后密封放入-20℃的低温箱中储存。

2.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：步骤(1)中钛金属板为纯钛金属板，其厚度为100μm～1000μm，冲孔孔径为48μm～200μm。

3.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：步骤(1)中的基板上的插槽之间间距相等，安装后的冲孔钛金属板之间互不碰触。

4.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：步骤(1)基板处于1000℃高温环境中，然后使用夹持工具将多张冲孔钛金属板分别插入到插槽中，然后自然冷却得到载体钛金属组合。

5.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：步骤(1)中的纤连蛋白溶液pH值为7.0，浓度为150μg/mL～300μg/mL。

6.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：步骤(2)中消毒液包含丙酮、无水乙醇和蒸馏水，依次采用丙酮、无水乙醇和蒸馏水在超声环境下对载体钛金属组合进行清洗，每次清洗时间为10min-20min。

7.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：步骤(3)中采用甲基丙烯酸酐(MA)对明胶(Gelatin)进行接枝改性，合成了甲基丙烯酸酰化明胶(GelMA)。

8.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：步骤(4)中缓冲液冲洗未结合的纤连蛋白的冲洗时间为10min-15min，缓冲液的PH值为7.0，冲洗温度为0℃～5℃。

9.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：步骤(5)中固化纤连蛋白载体钛金属完全浸没入储存液中。

10.根据权利要求1所述的一种保护纤连蛋白稳定性和生物学活性的方法，其特征在于：使用时将基板固定在离心设备上，离心甩去储存液，然后将固化纤连蛋白载体钛金属放入到PBS中浸泡，即可得到纤连蛋白工作液。