[发明专利]一种缓解化疗药物对肠黏膜损伤且提高抑瘤率的低分子量牡蛎酶解物制备方法及其应用

说明书

本发明属于功能食品生物技术领域，公开了一种牡蛎酶解物的制备方法和应用，牡蛎肉由胰蛋白酶水解，经分离得到，其小分子肽集中于1kDa以下，其与5‑FU联用时，200‑800mg/(kg·bw)范围时，可有效缓解S‑180荷瘤小鼠的肠黏膜损伤，小肠绒毛高度、隐窝深度、黏膜厚度和绒毛面积相对于5‑FU组均显著增加；同时提高抑瘤率到38.24～47.57％，较5‑FU单独使用有明显提高；在剂量为800mg/(kg·bw)时，显著增加荷瘤小鼠总蛋白、白蛋白以及免疫球蛋白含量，改善机体营养状况以及调节血清免疫抗体水平。本发明的低分子量牡蛎酶解物可应用于5‑FU联用的功能营养食品、特医食品或药物。

技术领域

本发明属于功能食品技术领域，更具体地，涉及一种缓解化疗药物对肠黏膜损伤且提高抑瘤率的低分子量牡蛎酶解物制备方法及其应用。

背景技术

据文献统计，在接受常规化疗药物之一的5-FU化疗的患者当中大约有50～80％患者伴有肠道炎症的发生。尽管5-FU具有良好的抗肿瘤作用，但严重的副作用也影响患者生活质量及化疗效果。据研究报道，5-FU在抑制肿瘤生长的同时，也易对其他正常体细胞表现出细胞毒性，如会抑制更新周期快的肠黏膜上皮细胞正常增殖，并同时诱导由细胞因子介导的肠细胞凋亡和肠道微生物群落改变，进一步导致肠道黏膜炎症的发生和恶化，使患者在化疗期间出现食欲不振，腹泻，感染和疲倦等症状，降低化疗耐受力和效果。因此，在化疗期间针对伴随产生的肠道黏膜炎症和损伤给予适当的辅助保护治疗，可预期获得更好的化疗效果。

目前市面上针对化疗伴随产生的肠道黏膜炎症的辅助保护治疗和提高机体免疫方面的单一营养素如谷氨酰胺、精氨酸等被证实通过免疫反应、紧密连接蛋白的调节改善肠损伤后黏膜修复，在炎症过程的调控以及肠道微生物群落的调节中发挥关键作用。而近年来，酶工艺的发展为食源性原料活性成分的提取研究提供了高效的途径。专利201710770663.5公开了一种以50KD海地瓜藻聚糖硫酸酯为主要活性物质的方便粥用于化疗型肠粘膜炎治疗的制备方法，但其主要成分是由特殊菌酶解获得的海地瓜岩藻多糖硫酸酯，因其酶解菌种非常规食品添加剂，其作为制备食品手段原料的风险未明。

牡蛎作为我国产量最大的养殖贝类，富含蛋白质、维生素以及微量元素铜、锌、铁、锰和硒，同时也被证实含有丰富的必需氨基酸、牛磺酸、有益胆固醇以及ω-3不饱和脂肪酸等对人体健康有益的物质。从牡蛎提取制备的寡肽和多糖等活性物质大多具有免疫调节和抗肿瘤活性。专利201310399203.8公开了一种牡蛎多糖可作为肠内营养成分辅助化疗，但其主要通过调节肠道微生物菌群来起作用，且制备过程步骤繁复，需使用有机溶剂进行分离纯化才能获得目标活性多糖。专利201310437598公开了一种含牡蛎酶解肽的肠黏膜保护与修复肠内营养制品，但其分子量范围为5kDa以下，酶解物单独作用效果未明确。专利201811570057.X公开了一种酶解来源的牡蛎多糖和牡蛎多肽的肠内营养制剂，能够作为增强免疫功能为肿瘤患者提供肠内营养支持，但未阐明单一牡蛎多肽在患者肠内营养当中的作用。专利201810327326公开了两条牡蛎来源的肠黏膜上皮细胞增殖和前移促进作用的小分子肽，但其分子量均超过1kDa，且动物实验效果未明确。

现有技术亟需一种制备方法简单，动物实验效果明确的，且具有缓解化疗药物对肠黏膜损伤，辅助提高抑瘤率并提高机体免疫指标等效果的低分子量牡蛎酶解物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中存在的上述问题，首先提供一种低分子量牡蛎酶解物的制备方法。

本发明的第二个目的是提供上述牡蛎酶解物的应用。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

一种低分子量牡蛎酶解物的制备方法，包括以下步骤：

(1)牡蛎肉均质化：新鲜牡蛎肉预处理后，采用400-600W，微波加热处理25-45s，灭菌去内源酶活，后加入等重量蒸馏水，高速剪切均质化呈无肉眼可见颗粒物浆液；