[发明专利]一种麦芽糖浆的制备方法及其应用

说明书

本发明涉及一种麦芽糖浆的制备方法及其应用，属于酶工程和发酵工程技术领域。其以一种酵母来源的淀粉酶SfA在特定条件下水解玉米淀粉获得的糖浆用于YCC166的发酵；发酵液中酪醇的水平与采用麦芽糖为原料得到的产量相当而发酵时间则进一步缩短。本发明提供的大肠杆菌YC166发酵产酪醇的原料主要是玉米淀粉，价格相对低廉，获得的酪醇发酵水平较高，发酵周期短于已见报道，具有良好的工业化应用前景，具备产业化价值。

技术领域

本发明涉及一种麦芽糖浆的制备方法及其应用，属于酶工程和发酵工程技术领域。

背景技术

酪醇是一种具有特殊药理作用的酚类有机化合物。采用微生物发酵法生产酪醇主要以葡萄糖为原料，原料成本低且可再生，是一种有发展前景的酪醇制备方法。Xu等构建了一株高产酪醇的重组大肠杆菌YMG5A*(Xu W,Yang C,XiaY,et al.High-level productionof tyrosol with noninduced recombinant Escherichia coli by metabolicengineering.Agricultural and Food Chemistry,2020,68:4616-4623)，文献中这株菌发酵产酪醇的最高产量为3.9g/L，发酵时间为48h。以后梁一晨等以上述YMG5A*菌株为基础进行了发酵条件的优化(

梁一晨，张海冰，张利华，等.高密度发酵大肠杆菌产酪醇[EB/OL].北京：中国科技论文在线,[2021-03-26].http://www.paper.edu.cn/releasepaper/content/202103-299.)，该论文报道的酪醇发酵最高水平为5.06g/L，以上是已见报道的酪醇发酵的最高水平。上述报道的酪醇发酵水平较高，但发酵时间较长，均为48h。梁一晨等通过自然筛选结合基因工程改造获得了一株酪醇发酵时间大幅度缩短的重组大肠杆菌YC166(梁一晨、张锦雯、沈微、陈献忠、杨海泉、夏媛媛、陈磊.一株缩短发酵周期的产酪醇重组大肠杆菌及其应用.中国发明专利申请,202110598376.7)，虽然这株菌的酪醇产量只有3.3g/L，发酵水平明显不如上述报道，但由于宿主菌生长快，细胞密度高，因此重组菌的发酵周期大幅度缩短，发酵时间只有24h，因此也有一定的应用前景。

重组菌YC166的宿主菌YEC166是一株野生型大肠杆菌，其性能与实验室常用大肠杆菌有着显著的不同。前期研究发现，YC166用于酪醇发酵时，其最适碳源并不是葡萄糖，而是麦芽糖。当YC166以纯麦芽糖为碳源进行发酵时，酪醇产量可以达到4.2g/L以上，发酵周期依然是24h。由于纯麦芽糖价格很高，因此不适合用作发酵原料，而采用真菌淀粉酶、β-淀粉酶等传统方法制备的麦芽糖浆可能由于纯度不足等原因，发酵得到的酪醇产量较低，应用价值不明显。

发明内容

本发明的目的是克服上述不足之处，提供一种麦芽糖浆的制备方法及其应用，其为重组大肠杆菌YC166发酵产酪醇提供一种针对性的碳源，以此进行的发酵可以获得较高的酪醇产量。

本发明的技术方案，一种麦芽糖浆的制备方法，以酵母淀粉酶SfA水解玉米淀粉，得到以麦芽糖和麦芽三糖为主要成分的麦芽糖浆。

进一步地，步骤为：以玉米淀粉为原料，加水配制质量浓度为8％-9％的淀粉悬液，加热至78-82℃使淀粉充分糊化，糊化后自然降温至40℃以下；在上述糊化淀粉液中按每克淀粉加入0.055-0.065U酶活单位的量准确加入酵母淀粉酶SfA，随后在39-41℃反应11-12h，即得到麦芽糖浆。

进一步地，所述酵母淀粉酶SFA是用重组乳酸克鲁维酵母YW07发酵制备的重组淀粉酶。

所述方法制备的麦芽糖浆的应用，将其应用于重组大肠杆菌发酵。

进一步地，所述重组大肠杆菌具体为重组大肠杆菌YC166。