[发明专利]一种头孢菌渣中头孢菌素C的液质联用检测方法

权利要求书

1.一种头孢菌渣中头孢菌素C的检测方法，其特征在于：它包括如下步骤：

a、标准品溶液制备：头孢菌素C标准品，加水配制成标准品溶液；

b、供试品溶液制备：取待测样品，加水混匀，涡旋，离心，取上清液过滤，即得供试品溶液；

c、分别吸取标准品溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪；

色谱条件为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：体积比10:90的甲醇和0.1％甲酸；

质谱条件为：电离方式：电喷雾正离子；扫描模式：多反应监测(MRM)。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤b所述待测样品与水的质量体积比为0.5～1.5g:10ml，优选1g:10ml；和/或，步骤a)和步骤b)所述水为去离子水。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤a所述标准品溶液制备的过程在冰盒中进行，制得的标准品溶液及时检测或放置于4℃冰箱中待测；步骤b所述供试品溶液制备的过程在冰盒中进行，制得的供试品溶液及时检测或放置于4℃冰箱中待测。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤b)所述混匀后再涡旋振荡3～10min，优选5min；所述离心速度2000～5000rpm/min，时间5～20min，优选速度4000rpm/min，时间10min；所述过滤是用0.22μm无机微孔滤膜过滤。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤c)所述色谱条件的色谱柱为Waters-C18柱，规格2.1×50mm，1.7μm；进样量为1-25μL，优选10μL；柱温为20-45℃，优选35℃；流速为0.1-0.3mL·min^-1，优选0.25mL·min^-1。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤c)所述质谱条件的离子源温度为150℃；去溶剂气温度为450℃；去溶剂气流量为650L/h；喷雾电压为3.2kv；锥孔电压为24V；碰撞电压18V；扫描母离子m/z为416.09，定量子离子m/z为142.99，定性子离子m/z为184.99。

7.一种头孢菌渣中头孢菌素C的含量测定方法，其特征在于：它包括如下步骤：

1)系列浓度的标准曲线工作溶液的制备

分别取等量无头孢菌素C残留的头孢菌渣，加入步骤a标准品溶液和水混匀，涡旋，离心，取上清液过滤，制成系列浓度的标准曲线工作溶液；

2)待测样品中头孢菌素C含量测定

分别取系列浓度的标准曲线工作溶液和步骤b供试品溶液，注入超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱仪，按照步骤c所述条件检测，以标准工作溶液浓度和测得的峰面积绘制标准曲线，根据标准曲线得到待测样品中头孢菌素C含量。

8.根据权利要求7所述的含量测定方法，其特征在于：步骤1)所述标准曲线工作溶液中头孢菌素C浓度为1.0～500.0μg/L。

9.根据权利要求8所述的含量测定方法，其特征在于：所述标准曲线工作溶液中头孢菌素C浓度为1.0μg/L、5.0μg/L、25.0μg/L、100.0μg/L和500.0μg/L。

10.根据权利要求8或9所述的含量测定方法，其特征在于：所述标准曲线工作溶液放置于4℃冰箱中。

11.根据权利要求7所述的含量测定方法，其特征在于：步骤1)所述涡旋振荡3～10min，优选5min；所述离心速度2000～5000rpm/min，时间5～20min，优选速度4000rpm/min，时间10min；所述过滤是用0.22μm无机微孔滤膜过滤。