[发明专利]一种用于农产品中九种真菌毒素同时富集净化的固相萃取柱

说明书

本发明提供了一种用于农产品中九种真菌毒素同时富集净化的固相萃取柱，该固相萃取柱以MIL‑101(Cr)纳米材料作为填料。本发明提供的用于农产品中九种真菌毒素同时富集净化的固相萃取柱，首次提出了用MIL‑101(Cr)纳米材料作为吸附剂固相萃取农产品中9种常见的真菌毒素，建立一种高效、环境温和、回收率高且价格低廉的前处理方法，克服了传统方法中农产品基质净化效果差，基质效应高的问题。

技术领域

本发明涉及真菌毒素检测领域，具体的说涉及一种用于农产品中九种真菌毒素同时富集净化的固相萃取柱。

背景技术

真菌毒素是由产毒真菌在适宜的环境条件下产生的有毒次级代谢产物，其中A型单端孢霉烯族化合物是一种广泛存在的真菌毒素，主要包括T-2毒素(T2)、HT-2毒素(HT2)和蛇形毒素(DAS)等。急性和慢性摄入这些毒素可引起多种毒性效应，如免疫抑制和细胞毒性等。欧洲食品安全局(EFSA)食物链中的污染物小组已经确定T-2和HT-2毒素的总摄入量(TDI)为100ng kg^-1。黄曲霉毒素(Aflatoxins)是一种由黄曲霉或寄生曲霉等真菌产生的有毒次生代谢产物，其中，最主要的为黄曲霉毒素B1(AFB1)，黄曲霉毒素B12(AFB2)，黄曲霉毒素G1(AFG1)，黄曲霉毒素G2(AFG2)，具有致癌性、致畸性和肝脏毒性等，AFB1被国际研究机构(IARC)列为I级致癌物质。赭曲霉毒素是继黄曲霉毒素后又一个引起世界广泛关注的真菌毒素，其中毒性最大、分布最广、对农产品的污染最重、与人类健康关系最密切的是赭曲霉毒素A(OTA)，赭曲霉毒素B(OTB)是OTA的脱氯衍生物，同样具有较高的毒性，主要会造成尿路肿瘤，肾病以及免疫抑制反应。这些毒素广泛存在于小麦、玉米、花生、稻谷等农作物中，严重危害人类的健康，因此，建立一种高效检测农产品中这几种毒素分析方法十分关键。

真菌毒素的富集净化前处理技术是建立灵敏检测方法的关键，有效富集目标物，减少样品的基质干扰能够显著提高检测的准确度和灵敏度。目前，对真菌毒素的富集净化方法主要包括液液萃取法、QUECHERS方法和固相萃取法(SPE)等，其中液液萃取法需要的有机溶剂较多，操作费时费力；QuEChERS是真菌毒素分析中应用最广泛的样品制备方法，但其对基质类型敏感，导致检测能力低，基质效应高。与之相比，固相萃取法因其富集因子高、干扰消除好、溶剂消耗少而得到越来越多的应用。其中，应用最为广泛的是免疫亲和柱(IACs)，但多数只针对一种或一类真菌毒素，价格昂贵，单只价格达到150元左右。

因此，亟需开发新的固相萃取柱用于农产品中多种真菌毒素的富集净化。

发明内容

本发明提供了一种用于农产品中九种真菌毒素同时富集净化的固相萃取柱，该萃取柱以MIL-101(Cr)纳米材料作为填料；

具体的说，本发明提供的用于农产品中九种真菌毒素同时富集净化的固相萃取柱，其包含：下筛板、填料和上筛板，其中填料为MIL-101(Cr)纳米材料；下筛板和上筛板均为聚乙烯板；

其中所述的九种真菌毒素为：T-2毒素(T2)、HT-2毒素(HT2)、蛇形毒素(DAS)、黄曲霉毒素B1(AFB1)，黄曲霉毒素B2(AFB2)，黄曲霉毒素G1(AFG1)，黄曲霉毒素G2(AFG2)、赭曲霉毒素A(OTA)、赭曲霉毒素B(OTB)；

本发明提供的用于农产品中九种真菌毒素同时富集净化的固相萃取柱，是在固相萃取空柱中，依次加入下筛板、填料和上筛板；

本发明还提供了上述固相萃取柱用于农产品中九种真菌毒素同时富集净化的方法，该方法包括如下步骤：

先将2％的乙腈水溶液作为上样溶液溶解提取的目标毒素，并通过装填好的MIL-101(Cr)固相萃取柱，流速约为每秒1-2滴；

然后用1mL正己烷淋洗杂质以消除干扰；

接着用含1％(V:V)甲酸的2mL丙酮(洗脱液)洗脱目标真菌毒素；