[发明专利]一种用于放疗敏感性检测的试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种用于放疗敏感性检测的试剂盒及其检测方法，其中，所述试剂盒针对13个SNP位点rs1801131、rs2243250、rs2010963、rs3025039、rs314280、rs314276、rs2868371、rs2242480、rs2030712、rs10898880、rs1805388、rs11466345、rs4680的多态性同时进行检测，所述试剂盒包括如下组分：扩增反应液、检测反应液和阳性对照。本发明的探针系统和检测试剂盒具有通量高、准确、特异性高的特点，将多种目标基因联合检测，单位时间和反应空内同时获得多个代谢基因的检测结果，本发明的检测方法快速、准确及超高灵敏度地检测13个SNP位点，根据检测结果，可实时、快速监测心脑血管药物代谢的基因位点的基因型，及时评估待测者的状况，为临床医师提供辅助治疗建议。

技术领域

本发明涉及一种用于放疗敏感性检测的试剂盒及其检测方法，属于基因检测领域。

背景技术

放射治疗是利用一种或多种电离辐射对恶性肿瘤及一些良性病进行的治疗，放射治疗的手段是电离辐射。肿瘤放射治疗从经验放疗模式开始，经历了反复发展和创新，至今有了很大变化，取得了巨大的进展。随着放疗发展至循证模式，循证医学已成为当今放疗之本，众多证据形成的各类指南可使我们在短时间内快速运用我们之前没有阅读过的大量信息。但循证模式以大量统计学数据为基础，是主要针对整个患者群体的治疗模式，它的群体化信息用于指导个体患者的治疗是有缺陷的。所以，“个体化放疗”是目前最理想的模式，其根据是在大量的个体临床、病理和分子、基因水平参数等指导下治疗的“量体裁衣”，这是放疗未来的发展方向。

目前，对于基因多态性检测的方法主要有直接测序法、高分辨率熔解曲线法、等位基因特异性扩增法、taqman荧光探针法等。其中，此类方法普遍扩增通量不高。因此，需要建立一种简单、价格低廉的高通量检测基因多态性的方法。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的是获得一种用于放疗敏感性检测的试剂盒及其检测方法。

为实现上述发明目的，本发明采用的用于放疗敏感性检测的试剂盒的技术方案如下：

本发明的试剂盒针对13个SNP位点rs1801131、rs2243250、rs2010963、rs3025039、rs314280、rs314276、rs2868371、rs2242480、rs2030712、rs10898880、rs1805388、rs11466345、rs4680的多态性设计特异性扩增引物和，所述试剂盒包括如下组分：扩增反应液、检测反应液、阳性对照。

优选地，所述扩增反应液包括扩增引物，所述检测试剂包括定位探针、检测探针、阳性探针和定位参照。

优选地，所述扩增引物为特异性引物，如下表所示：

优选的，所述的13个SNP位点rs1801131、rs2243250、rs2010963、rs3025039、rs314280、rs314276、rs2868371、rs2242480、rs2030712、rs10898880、rs1805388、rs11466345、rs4680的多态性设计特异性扩增上游引物序列如序列表SEQ ID NO:1～SEQID NO:13所示；所述下游引物序列序列如序列表SEQ ID NO:14～SEQ ID NO:26所示。扩增引物对其中一条5`端采用CY5标记。所述的定位探针序列如SEQ ID NO:27所示，定位探针杂交时加入PCR产物和杂交液的混合物中，与芯片上的定位参照结合，可作为杂交的质控，另外具有芯片矩阵的定位作用。

所述检测反应液中的各组分序列如下表所示：