[发明专利]一种成纤维细胞激活修复方法

权利要求书

1.一种成纤维细胞激活修复方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：首先，利用组织截取装置从小鼠成纤维细胞组织处剪切1-3mm的碎块，然后将该碎块置于试管内，向试管内加入适量的胰酶，然后将其置于培养箱内培养15-20分钟，取出试管，利用试管摇匀装置对试管进行反复晃动，晃动后加入培养液终止胰酶对组织的消化；

S2：利用离心装置对试管内的培养液进行离心，离心1000转，离心的时间控制在5-8分钟，离心后，利用吸取装置吸取掉试管内的上层清液，然后再向试管内加入适量培养液，再对试管晃动15-20次；

S3：摇匀后，将试管再次置于培养箱内，控制培养条件为温度37摄氏度、5％浓度的二氧化碳和足够的湿度进行培养，培养3-7天后，细胞会相互重叠爬满整个培养瓶，再次利用吸取装置吸取掉试管内的上层清液，再次加入0.25％浓度的胰酶至试管内进行消化，利用监测装置进行观察，当少量细胞漂浮，贴壁的细胞层出现裂隙时，即刻加入培养液终止消化，再次利用离心装置进行离心，离心后吸取上层清液，接着加入足够多的培养液，即可制成成纤维细胞悬液；

S4：将制成的成纤维细胞悬液注入至受伤小鼠的体内，然后每间隔一端时间利用监测装置观察小鼠创口的变化情况，所述变化情况包括伤后第3天及伤后第14天的变化情况，

在伤后第3天的创面内纤维素凝快中尚无成纤维细胞浸润，仅有FN与VN作为成纤维细胞迁移、增殖和合成ECM的暂时性支架载体,同时成纤维细胞才由静止表型向迁移型转换，并逐渐向创伤中心迁移，迅速增殖，大量合成胶原，此种合成表型的成纤维细胞的特征是细胞内含有丰富的粗面内质网和高尔基体；

在伤后第14天，成纤维细胞在多种细胞因子的诱导作用下，大量转换为收缩表型，即肌成纤维细胞，并通过成纤维细胞表面的整合素调节ECM，使伤口发生收缩，创面愈合，从而完成利用成纤维细胞对创口的修复。

2.根据权利要求1所述的一种成纤维细胞激活修复方法通过修复系统实施，其特征在于，所述修复系统包括组织截取装置、离心装置、吸取装置、监测装置和试管摇匀装置。

3.根据权利要求2所述的一种成纤维细胞激活修复方法，其特征在于，所述组织截取装置为无菌眼科小剪刀或无菌刮胡刀中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的一种成纤维细胞激活修复方法，其特征在于，所述离心装置包括外壳，且外壳的一侧内壁设置有马达，所述马达的输出轴通过联轴器连接有离心杆，所述外壳远离马达的外壁设置有手持柄。

5.根据权利要求4所述的一种成纤维细胞激活修复方法，其特征在于，所述吸取装置包括吸取筒，且吸取筒为软塑材质，所述吸取筒的一端套接有吸取头。

6.根据权利要求5所述的一种成纤维细胞激活修复方法，其特征在于，所述监测装置为显微镜或电子放大镜中的至少一种。

7.根据权利要求6所述的一种成纤维细胞激活修复方法，其特征在于，所述试管摇匀装置包括伺服电机，且伺服电机的输出轴连接有转杆，所述转杆远离伺服电机的一端设置有夹取框，所述夹取框的两侧内壁均设置有电动伸缩杆，所述电动伸缩杆活塞杆的一端设置有夹环，所述夹环的内壁设置有防滑凸起。

8.根据权利要求7所述的一种成纤维细胞激活修复方法，其特征在于，所述马达、伺服电机和电动伸缩杆分别通过导线连接有开关，且开关连接有控制器，控制器的型号为DATA-7311。