[发明专利]一种CAR-T细胞无血清培养基及其培养方法在审
申请号: | 202111309298.0 | 申请日: | 2021-11-06 |
公开(公告)号: | CN113817685A | 公开(公告)日: | 2021-12-21 |
发明(设计)人: | 曾献芳;郭威;胡玉林 | 申请(专利权)人: | 曾献芳 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N5/0783 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 450000 河南省郑*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 car 细胞 血清 培养基 及其 培养 方法 | ||
1.一种CAR-T细胞无血清培养基,其特征在于,由基础培养基和添加在培养基中的以下成分组成:尼麦角林、淫羊藿苷、阿魏酸酯、IL-2、IL-15、维生素E、L-谷氨酰胺。
2. 根据权利要求1所述CAR-T细胞无血清培养基,其特征在于,各成分在培养基中浓度为:尼麦角林2.5-3.5ng/mL、淫羊藿苷6.8-9.6ng/mL、阿魏酸酯8.5-10 ng/mL、IL-2 100-200IU/mL、IL-15 300-500 IU/mL、维生素E 20-30μg/mL、L-谷氨酰胺10-18μg/mL。
3.根据权利要求1所述CAR-T细胞无血清培养基,其特征在于,各成分在培养基中浓度为:尼麦角林2.8ng/mL、淫羊藿苷8.2ng/mL、阿魏酸酯9.4ng/mL、IL-2 150IU/mL、IL-15 400IU/mL、维生素E 25μg/mL、L-谷氨酰胺15μg/mL。
4.根据权利要求1所述CAR-T细胞无血清培养基,其特征在于,所述基础培养基为X-VIVO 15培养基。
5.一种CAR-T细胞的培养方法,其特征在于,采用权利要求1至4任一项所述培养基培养。
6.根据权利要求5所述CAR-T细胞的培养方法,其特征在于,包括以下步骤:将CAR-T细胞和同等数量的CD3/CD28磁珠加入权利要求1至4任一项所述培养基中,在37℃,5%CO2培养箱中培养10天。
7.根据权利要求6所述CAR-T细胞的培养方法,其特征在于,所述CAR-T细胞在培养基中浓度为1-5×106个/mL。
8.根据权利要求6所述CAR-T细胞的培养方法,其特征在于,培养过程中每隔1-2天补充一次培养基。
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