[发明专利]一种构建脐带间充质干细胞库用冻存保护液及细胞库的构建方法

权利要求书

1. 一种构建脐带间充质干细胞库用冻存保存液，其特征在于，包括培养基和添加在培养基中以下成分：腺苷、卡瓦胡椒内酯、镰叶芹二醇、丙酸钾、羟乙基淀粉注射液、硫辛酸、维生素E、 L-谷氨酰胺。

2.根据权利要求1所述构建脐带间充质干细胞库用冻存保存液，其特征在于，所述培养基为DMEM低糖培养基。

3. 根据权利要求1所述构建脐带间充质干细胞库用冻存保存液，其特征在于，各成分在培养基中的终浓度为：腺苷1-5μg/mL、卡瓦胡椒内酯9-12.5ng/mL、镰叶芹二醇10-15 ng/mL、丙酸钾5-10μg/mL、羟乙基淀粉注射液10-15μg/mL、硫辛酸0.5-0.8 μg/mL、维生素E3.5-5μg/mL、L-谷氨酰胺6.5-8.5μg/mL。

4.根据权利要求1所述构建脐带间充质干细胞库用冻存保存液，其特征在于，各成分在培养基中的终浓度为：腺苷3μg/mL、卡瓦胡椒内酯10.5ng/mL、镰叶芹二醇12ng/mL、丙酸钾8μg/mL、羟乙基淀粉注射液12.5μg/mL、硫辛酸0.7 μg/mL、维生素E 4μg/mL、L-谷氨酰胺7μg/mL。

5.一种脐带间充质干细胞库的构建方法，其特征在于，采用权利要求1至4任一项所述的冻存保护液。

6.根据权利要求5所述脐带间充质干细胞库的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：取传代培养得到的脐带间充质干细胞，经检测合格后离心去除培养基，加入权利要求1至5任一项所述冻存保护液重悬，分装于冻存管中，然后进行程序降温，转移至液氮中冷冻保存，建立可供检索的细胞信息档案，即构建得到脐带间充质干细胞库。

7.根据权利要求5所述脐带间充质干细胞库的构建方法，其特征在于，程序降温的过程为：先以1-2℃/min降温至-20℃，然后再以5℃/min降温至-80℃，最后转移至液氮中保存。

8.根据权利要求5所述脐带间充质干细胞库的构建方法，其特征在于，所述脐带间充质干细胞为传代培养得到的P3-P5代脐带间充质干细胞。

9.根据权利要求5所述脐带间充质干细胞库的构建方法，其特征在于，每个冻存管中分装2-3mL冻存保护液，所述冻存保护液中细胞的密度为2-7×10⁷个/mL。