[发明专利]一种基于席夫碱的次氯酸荧光探针及其制备方法

说明书

本申请属于荧光探针领域，具体涉及一种基于席夫碱的次氯酸荧光探针及其制备方法。该荧光探针基于萘酰亚胺和2‑呋喃甲酰肼发生缩合反应合成，具有易被次氯酸特异性引发的席夫碱结构，探针与次氯酸发生亲核加成反应使探针分子整体的共轭结构发生改变，导致紫外可见吸收光谱出现新的吸收峰，荧光发射强度显著增强。因此，是一种理想的次氯酸荧光探针。另外，该合成工艺具有操作简单、产率高、成本低等优点。

技术领域

本申请属于荧光探针领域，具体涉及一种基于席夫碱的次氯酸荧光探针及其制备方法。

背景技术

次氯酸(HClO)是ROS的重要组成部分，当细菌侵入人体或表皮受损时，体内白细胞中的中性粒细胞分泌内源性HClO来对抗细胞的感染，体内白细胞中的中性粒细胞分泌内源性HClO，通过破坏这些外来细菌和病毒的结构，使其无法生存，从而抵抗这些外来细菌和病毒。次氯酸作为氧化剂和漂白剂，常用于工业生产或日常生活中，次氯酸作为强氧化性可以给自来水消毒，次氯酸作为漂白剂可以使有机染料褪色。次氯酸在人类日常生活中发挥着不可替代的作用，然而，过量的HClO会对机体健康造成极大的危害，可能导致组织坏死和诸如动脉粥样硬化和癌症等疾病。因此，检测环境和体内的次氯酸是一个急需解决的问题。

近些年来已经研究出很多方法检测次氯酸，荧光探针法因具有检测限低、灵敏度高、合成简单、成本低廉、实时成像和生物相容性好等优异的特性受到广泛关注。设计合成反应型次氯酸荧光探针的引发机理主要是基于次氯酸与碳碳双键、硫族化合物、席夫碱、硼酸酯等的反应。本发明通过带有醛基的萘酰亚胺荧光团与2-呋喃甲酰肼发生酰胺缩合反应生成具有席夫碱结构的新化合物，形成了以C＝N键为识别位高选择性的次氯酸荧光探针。本专利所得探针对次氯酸具有很好的选择性，能够在环境和复杂生物体内准确地识别出次氯酸。

发明内容：

本发明提供了一种基于席夫碱的次氯酸荧光探针及其制备方法。该荧光探针基于萘酰亚胺和2-呋喃甲酰肼发生缩合反应合成，具有易被次氯酸特异性引发的席夫碱结构，探针与次氯酸发生亲核加成反应使探针分子整体的共轭结构发生改变，导致紫外可见吸收光谱出现新的吸收峰，荧光发射强度显著增强。因此，是一种理想的次氯酸荧光探针。另外，该合成工艺具有操作简单、产率高、成本低等优点。

为了实现上述目的，本申请采取的解决方案如下：

一种基于席夫碱的次氯酸荧光探针，其具体结构如下：

制备所述的基于席夫碱的次氯酸荧光探针，具体路线如下：

所述的基于席夫碱的次氯酸荧光探针，具体合成步骤如下：

1)称取4-溴-1,8-萘二甲酸酐和正丁胺溶于溶剂，在80-90℃恒温搅拌下反应10-15h后，冷却到室温，静置溶液析出固体，抽滤，柱色谱分离，真空干燥，即得化合物1；

2)称取CH₃ONa、CuSO₄·5H₂O和步骤1)得到的化合物1溶于溶剂，在80-100℃下恒温反应7-10h，冷却到室温，静置溶液析出白色晶体，抽滤，柱色谱分离，真空干燥，即得化合物2；

3)称取步骤2)得到的化合物2溶于溶剂，在140-145℃下恒温反应10-15h后，冷却到室温，用浓度为50％氢氧化钠溶液调节pH至溶液呈中性，乙酸乙酯萃取，干燥，柱色谱分离，真空干燥，即得化合物3；

4)称取乌洛托品和步骤3)得到的化合物3溶于溶剂，在75-95℃下恒温反应10-24h，冷却到室温，用50％氢氧化钠溶液调节pH至溶液呈中性，抽滤，柱色谱分离，真空干燥，即得化合物4；

5)称取2-呋喃甲酰肼和步骤4)得到的化合物4溶于溶剂，在50-100℃下恒温反应4-15h后，冷却到室温，抽滤，柱色谱分离，真空干燥，即得探针NAFH。