[发明专利]一种二肽二氨基丁酰苄基酰胺的合成方法

说明书

本发明涉及多肽合成领域，特别涉及一种二肽二氨基丁酰苄基酰胺的合成方法，本发明采用Bpoc‑β‑Ala‑OH、H‑Pro‑OH、H‑Dab(Bpoc)‑OH和苄基胺为原料合成类蛇毒三肽，有利于工业规模化生产，同时也降低了生产成本，有利于类蛇毒三肽在化妆品行业中的推广应用。

技术领域

本发明涉及多肽合成领域，特别涉及一种二肽二氨基丁酰苄基酰胺的制备方法。

技术背景

Waglerin-1是Temple Viper毒蛇的毒液，已被证明可抑制乙酰胆碱与乙酰胆碱受体(位于神经肌肉连接处)的结合，从而抑制肌肉运动。2006年，帝斯曼（DSM）全资子公司彭特法姆（pentapharm）从研发的类蛇毒肽产品以SYN-AKE命名上市。类蛇毒肽，是一种合成三肽，因模拟蛇毒Waglerin-1的作用机理而得名。该三肽可拮抗性的与乙酰胆碱受体结合，局部阻断神经传递肌肉收缩信息，使脸部肌肉放松，以达到抚纹祛皱的目的。该类蛇毒三肽的化学名称为：二肽二氨基丁酰苄基酰胺二乙酸盐，是一种模拟蛇毒毒素Waglerin 1活性的化学合成三肽，其结构为H-β-Ala-Pro-Dab-NHBzl·2AcOH,CAS号：823202-99-9，分子式：C₁₉H₂₉N₅O₃，分子量：495.51。

类蛇毒三肽，作为当前应用较广的祛皱明星功效活性成分，市场需求量逐年增加，现有工业上生产的方法采用Z-β-Ala-OH、H-Pro-OH、H-Dab(Z)-OH和苄基胺为原料合成，合成过程中用到10%钯-碳的作为催化剂脱保护基Z,合成成本较高，而且对生产条件要求苛刻，存在不安全因素。为解决类蛇毒三肽工业大规模生产中存在的难题，本申请的技术方案选择Bpoc-β-Ala-OH、H-Pro-OH、H-Dab(Bpoc)-OH和苄基胺为原料合成类蛇毒三肽，这样在合成过程中避开10%钯-碳的使用，有利于工业规模化生产，同时也降低了生产成本，有利于类蛇毒三肽在化妆品行业中的推广应用。

发明内容

为解决合成过程中存在的以上问题，本发明提供了一种二肽二氨基丁酰苄基酰胺的合成方法，具体技术方案如下：

(a)采用Bpoc-β-Ala-OSu和H-Pro-OH为原料,在碱性条件下合成Bpoc-β-Ala-Pro-OH，然后制备成Bpoc-β-Ala-Pro-OSu;

(b)采用Bpoc-β-Ala-Pro-OSu和H-Dab(Bpoc)-OH为原料,在碱性条件下合成Bpoc-β-Ala-Pro-Dab(Bpoc)-OH;

(c)采用Bpoc-β-Ala-Pro-Dab(Bpoc)-OH和苄基胺为原料，在偶联剂存在下反应得到Bpoc-β-Ala-Pro-Dab(Bpoc)-NHBzl;

(d)Bpoc-β-Ala-Pro-Dab(Bpoc)-NHBzl脱掉侧链保护基团，经重结晶，真空干燥得到二肽二氨基丁酰苄基酰胺精肽。

优选的，步骤(a)中，制备Bpoc-β-Ala-Pro-OH的具体操作步骤为：取碱A溶解在溶剂B中，配成碱性溶液；在低温浴下将H-Pro-OH溶解于配置好的碱溶液中，且溶解后溶液仍显碱性；低温下向反应液中加入Bpoc-β-Ala-OSu/溶剂C溶液，滴加完毕后，升温继续搅拌反应,经浓缩、调酸、析晶、重结晶，得到二肽Bpoc-β-Ala-Pro-OH。

优选的，步骤(a)中，制备Bpoc-β-Ala-Pro-OSu的具体操作步骤为：

将Bpoc-β-Ala-Pro-OH和HOSu溶解于溶剂C中，低温搅拌下加入DCC/溶剂C的溶液，TLC监测终点，经过滤、浓缩、析晶、重结晶得到Bpoc-β-Ala-Pro-OSu。