[发明专利]与控制辣椒果实Vc含量基因连锁的SNP分子标记KQ8-3918及应用和专用引物有效
申请号: | 202111315880.8 | 申请日: | 2021-11-08 |
公开(公告)号: | CN113881802B | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
发明(设计)人: | 张晓芬;耿三省;陈斌;杜和山;王怡心 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 北京五洲洋和知识产权代理事务所(普通合伙) 11387 | 代理人: | 荣红颖 |
地址: | 100097 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 控制 辣椒 果实 vc 含量 基因 连锁 snp 分子 标记 kq8 3918 应用 专用 引物 | ||
本发明属于辣椒品种选育技术领域,涉及一种与控制辣椒果实Vc含量基因紧密连锁的SNP分子标记KQ8‑3918、扩增该分子标记的专用引物、试剂盒以及他们的应用。本发明通过SLAF‑seq技术对包含252个株系的RILs群体构建辣椒高密度完全连锁遗传图谱,结合RILs各株系果实Vc含量三个季节的表型数据,将控制果实Vc含量的主效QTL定位到1号染色体,并获得紧密连锁的SNP分子标记KQ8‑3918,该标记位于1号染色体32485915bp。利用本发明分子标记开发的特异性扩增引物,可以高效、准确地鉴定辣椒材料或品种是否属于高果实Vc含量材料或品种,可显著提高育种效率。
技术领域
本发明涉及一种辣椒品种选育技术领域,特别涉及一种与控制辣椒果实Vc含量基因连锁的SNP分子标记KQ8-3918、扩增该分子标记的专用引物、试剂盒以及他们的应用。
背景技术
辣椒是世界范围内广泛栽培的一种重要蔬菜兼经济作物,也是我国许多地区的主要经济支柱作物。随着人民生活水平的不断提高,消费者对优质农产品的需求更为迫切,蔬菜品质正受到人们越来越多的关注。辣椒品质改良已成为辣椒育种工作的重要研究课题。
辣椒是公认的果实维生素C(Vc)含量最高的蔬菜,果实Vc含量是辣椒的一个重要营养品质。然而不同辣椒品种之间果实Vc含量差异非常显著。选育果实高Vc含量的品种是辣椒品质育种的一个重要方向。常规蔬菜育种技术对目的基因型植株的选择多依赖于植株表型,而对一些诸如果实Vc含量、辣椒红素含量和辣椒碱含量等的数量性状,则无法借助植株表型对目标性状进行选择。利用分子标记辅助选择(MAS)育种技术,并与单倍体育种技术和传统育种方法相结合,可以极大地提高选择效率,大大加快材料创新和品种选育的进程,也是缩小我国与发达国家之间辣椒育种差距的必由之路。然而,辣椒参与果实Vc生物合成、循环、降解的代谢途径尚未明确,对辣椒果实Vc的研究也仅限于遗传规律等方面,分子水平研究进展缓慢。迄今还没有可用于选育高果实Vc含量辣椒品种的分子标记,因此,开发与控制辣椒辣椒果实Vc含量基因紧密连锁的分子标记,建立分子标记辅助育种技术体系,对加快高果实维生素C含量辣椒品种的选育尤为重要。
发明内容
针对现有技术的缺陷,本发明的目的之一在于提供一种与控制辣椒果实Vc含量基因连锁的SNP分子标记KQ8-3918。该分子标记为高Vc含量辣椒品种的选育提供了新得途径。
本发明的目的之二在于提供一种用于扩增与控制辣椒果实Vc含量基因连锁的SNP分子标记KQ8-3918或用于确定SNP分子标记KQ8-3918对应的基因型的KASP特异性引物。
本发明的目的之三在于提供一种包含上述KASP特异性引物的试剂盒。
本发明的目的之四在于提供上述SNP分子标记KQ8-3918、KASP特异性引物以及试剂盒的应用。
本发明的目的之五在于提供一种鉴定辣椒果实Vc含量高低的方法。
为了实现上述目的,本发明采用了以下技术方案:
第一方面,本发明提供一种与控制辣椒果实Vc含量基因连锁的SNP分子标记KQ8-3918,所述分子标记位于1号染色体的32485915bp处,碱基为A或G;所述分子标记对应的基因型:G:G和A:G为辣椒高果实Vc含量的基因型;A:A为辣椒低果实Vc含量的基因型。
第二方面,本发明还提供一种KASP特异性引物,用于扩增与控制辣椒果实Vc含量基因连锁的SNP分子标记KQ8-3918或用于确定SNP分子标记KQ8-3918对应的基因型,所述特异性引物包括第一正向引物、第二正向引物和通用反向引物。
优选地,本发明所述KASP特异性引物,第一正向引物的碱基序列如序列表SEQ IDNO.1所示;第二正向引物的碱基序列如序列表SEQ ID NO.2所示;通用反向引物的碱基序列如序列表SEQ ID NO.3所示。
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