[发明专利]施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE蛋白在介导同源重组上的应用有效
| 申请号： | 202111318814.6 | 申请日： | 2021-11-09 |
| 公开（公告）号： | CN114163506B | 公开（公告）日： | 2023-08-25 |
| 发明（设计）人： | 冯雁;黄飞 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C07K14/21 | 分类号： | C07K14/21;C12N15/31;C12N15/78;C12N15/66;C12N15/90;C12N1/21;C12R1/38 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人： | 褚明伟 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 施氏假单胞 杆菌 来源 pspiwi re 蛋白 同源 重组 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种可以实现同源重组敲除的基因编辑系统，其特征在于，由两个质粒组成，
其中一个质粒表达施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE蛋白，其是将施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE蛋白编码基因经过密码子优化后克隆到表达载体pET28a载体上得到，用以在大肠杆菌中表达施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE蛋白，施氏假单胞杆菌来源的PsPIWI-RE蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；
另一个质粒提供同源重组所需目标基因序列上下游同源臂，其是将大肠杆菌(E.Coli) LacZ基因内待敲除300bp片段上下游各500bp序列通过化学合成为一条1Kb的DNA片段，再将该1Kb DNA片段克隆到pUC19载体上所得，大肠杆菌(E. Coli) LacZ基因上游同源臂序列如SEQ ID No.5所示，大肠杆菌(E. Coli) LacZ基因下游同源臂序列如SEQ ID No.6所示。
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