[发明专利]甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法、偶联磁珠及试剂盒在审

专利信息
申请号: 202111320937.3 申请日: 2021-11-09
公开(公告)号: CN114034865A 公开(公告)日: 2022-02-11
发明(设计)人: 杨美玲;梁晓丹;刘雄浪;闫承夫;夏皓男 申请(专利权)人: 石家庄斯巴克生物科技有限公司
主分类号: G01N33/574 分类号: G01N33/574;G01N33/68;G01N33/576;G01N33/543;G01N33/531
代理公司: 郑州汇诚众远专利代理事务所(普通合伙) 41211 代理人: 栗星
地址: 050000 河北省石家庄市高新区太行*** 国省代码: 河北;13
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摘要:
搜索关键词: 蛋白 抗体 包被 方法 偶联磁珠 试剂盒
【权利要求书】:

1.一种甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法,其特征在于:在甲胎蛋白抗体中加入预处理液进行预处理,之后将经过预处理的甲胎蛋白抗体与羧基磁珠偶联,得到甲胎蛋白抗体偶联磁珠,其中预处理液包括十二烷基硫酸钠溶液。

2.根据权利要求1所述的一种甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法,其特征在于:十二烷基硫酸钠溶液的浓度为0.2~0.3%,预处理时间为5~10min,预处理温度为20~25℃。

3.根据权利要求2所述的一种甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法,其特征在于:十二烷基硫酸钠溶液的浓度为0.2%、预处理时间为10min,预处理温度为25℃。

4.根据权利要求1所述的一种甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法,其特征在于:所述预处理液还包括浓度为10mM~80mM的MES缓冲液。

5.根据权利要求1所述的一种甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法,其特征在于:羧基磁珠在于甲胎蛋白抗体偶联前,与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与N-羟基琥珀酰亚胺的混合液进行混合活化,其中1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与N-羟基琥珀酰亚胺的浓度均为8~12mg/ml;活化温度为23~28℃,活化时间为10~20min。

6.根据权利要求5所述的一种甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法,其特征在于:将经过活化的羧基磁珠在MES缓冲液中洗涤2~3次,其中MES缓冲液的浓度为10mM~80mM,pH为5.5~7.5,之后将经过预处理的甲胎蛋白抗体和经过洗涤的羧基磁珠进行混合偶联的温度为22~28℃,混合偶联时间为1~5h。

7.根据权利要求6所述的一种甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法,其特征在于:将经过偶联的磁珠放入含有0.1%BSA的MES缓冲液中封闭处理,其中密封时间为5~8h,密封温度为22~28℃,之后将经过密封处理的偶联磁珠加入到Tris缓冲液重悬保存,保存温度为2~8℃。

8.根据权利要求1所述的一种甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法,其特征在于:所述甲胎蛋白抗体包被每毫克羧基磁珠的量为10~30μg。

9.一种偶联磁珠,其特征在于:通过权利要求1-8任一项所述的甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法制得的偶联磁珠。

10.一种试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括权利要求1-8任一项所述的甲胎蛋白抗体包被磁珠的方法制得的甲胎蛋白抗体偶联磁珠。

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