[发明专利]一种多功能牡蛎活性多肽及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种多功能牡蛎活性多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将新鲜牡蛎全脏器清洗，沥干，高速组织捣碎匀浆，加入去离子水，调pH值为6.5-7.5，温水浴20-60 min后，分别加 1000 U/g蛋白的复合蛋白酶，酶解3-6 h，酶解结束后，100 ℃ 灭酶10 min；

（2）采用梯度离心后取上清液，冷藏温度条件下，通过不同截留分子量的超滤膜进行分离，得到分子量小于3000 Da的酶解液，浓缩，-80 ℃ 保存24 h，冷冻干燥，得到多功能牡蛎活性多肽。

2.根据权利要求1所述的多功能牡蛎活性多肽的制备方法，其特征在于，所述的温水浴的温度为45-65 ℃。

3.根据权利要求1所述的多功能牡蛎活性多肽的制备方法，其特征在于，所述的复合蛋白酶为庞博动物蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的多功能牡蛎活性多肽的制备方法，其特征在于，所述的梯度离心的具体过程为3000 r/min转速离心5 min，然后5000 r/min转速离心5 min，最后8000 r/min转速离心20 min。

5.根据权利要求1所述的多功能牡蛎活性多肽的制备方法，其特征在于，所述的冷藏温度的温度为2-8 ℃。

6.一种由权利要求1-5任一项所述的制备方法制得的多功能牡蛎活性多肽。

7.一种如权利要求6所述的多功能牡蛎活性多肽在软组织修复药物中的应用，其特征在于，将多功能牡蛎活性多肽制成包括粉末状、溶液状、乳状、膏状、水凝胶状、复合纤维膜状的任一种药物。

8.根据权利要求7所述的多功能牡蛎活性多肽在软组织修复药物中的应用，其特征在于，所述复合纤维膜状药物为通过静电纺丝技术制得的静电纺丝复合纤维膜，其制备方法为：

a. 将多功能牡蛎活性多肽溶于超纯水中，使其完全溶解，以制得多功能牡蛎活性多肽溶液；

b. 将载体材料溶于溶剂中，以制得载体材料溶液；所述载体材料包括基料和辅料，所述基料与辅料的质量比为1:1-3:1；所述基料为聚乙二醇或聚醋酸乙烯酯，所述辅料为鱼皮胶原蛋白或壳聚糖；所述溶剂为二氯甲烷、三氟乙酸、氯仿中的任一种；所述载体材料溶液的浓度为7%-12wt%；

c. 将步骤a和步骤b所得的溶液充分涡旋混合，使其充分溶解，制得纺丝溶液；纺丝溶液中多功能牡蛎活性多肽的浓度为3-12wt%；

d. 使用步骤c所获得纺丝溶液，采用静电纺丝的方法，制备获得静电纺丝复合纤维膜；静电纺丝所用溶剂为二氯甲烷、三氟乙酸、氯仿中的任一种。

9.根据权利要求8所述的多功能牡蛎活性多肽在软组织修复药物中的应用，其特征在于，步骤d中静电纺丝电压为10-15 kV，注射器针头与接收板之间的距离可为10-15 cm，注射泵的推进速度可为0.05-0.50 mL/min，纺丝环境温度可为35-39 ℃。