[发明专利]一种荧光抗体封存液、制备方法和用途在审
申请号: | 202111323989.6 | 申请日: | 2021-11-09 |
公开(公告)号: | CN114088936A | 公开(公告)日: | 2022-02-25 |
发明(设计)人: | 杨燕斌;赵朝辉;唐海燕;钟越 | 申请(专利权)人: | 重庆创芯生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N33/543;G01N33/573;G01N33/68 |
代理公司: | 重庆市前沿专利事务所(普通合伙) 50211 | 代理人: | 刘代春;郭云 |
地址: | 400700 重*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 荧光 抗体 封存 制备 方法 用途 | ||
1.一种荧光抗体封存液,其特征在于,主要由海藻糖、BSA、聚乙烯吡咯烷酮和山梨醇通过HEPES缓冲液配制而成;其中,按质量百分比计,海藻糖:5%~20%,BSA:0.1%~1.0%,聚乙烯吡咯烷酮:0.1%~1.0%,山梨醇:0.1%~5.0%,其余为HEPES缓冲液。
2.根据权利要求1所述的荧光抗体封存液,其特征在于,还包括透明质酸钠,按质量百分比计,透明质酸钠:0.05%~0.1%。
3.根据权利要求2所述的荧光抗体封存液,其特征在于,按质量百分比计,海藻糖:5%~10%,BSA:0.5%~1.0%,聚乙烯吡咯烷酮:0.5%~1.0%,山梨醇:0.5%~1.0%,透明质酸钠:0.05%~0.1%,其余为HEPES缓冲液。
4.根据权利要求1所述的荧光抗体封存液,其特征在于,按质量百分比计,海藻糖:5%~10%,BSA:0.5%~1.0%,聚乙烯吡咯烷酮:0.5%~1.0%,山梨醇:0.5%~1.0%,其余为HEPES缓冲液。
5.一种荧光抗体封存液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
第一步,配制20mmol/L的HEPES缓冲液;
第二步,用1mol/L的氢氧化钠调pH7.4~7.6;
第三步,顺序加入构成权利要求1~4中任意一项所述荧光抗体封存液的其余组分,充分溶解后即可。
6.一种荧光抗体封存液的用途,其特征在于,按权利要求5的制备方法获得的权利要求1或4所述的荧光抗体封存液,用于将活化后的荧光微球抗体稀释后封存在心肌检测的自驱动微流控芯片的混合区内。
7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,还包括以下步骤,
第一步,将荧光微球用交联剂EDC/NHS在37℃条件下活化20min~40min,荧光微球与EDC/NHS的质量比为100∶1~1∶1;
第二步,将活化后的荧光微球加入到抗体溶液中,并在37℃条件下反应2h~3h,荧光微球与抗体的质量比为20∶1~5∶1;
第三步,用冷冻离心机对抗体荧光微球反应后的溶液离心分离,并在去除未标记的抗体后,加入HEPES缓冲液重悬抗体微球结合物;
第四步,重复执行第三步至少一次;
第五步,再用冷冻离心机对抗体微球反应后的溶液进行离心分离,并在去除未标记的抗体微球后,加入权利要求1或4所述的荧光抗体封存液重悬抗体微球结合物。
8.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,在加入所述HEPES缓冲液的重悬过程中,以重悬后的质量百分比计,按混合液中荧光抗体微球结合物的固含量为0.5%的比例加入所述HEPES缓冲液;在加入所述荧光抗体封存液的重悬过程中,以重悬后的质量百分比计,按混合液中荧光抗体微球结合物的固含量为0.2%的比例加入所述荧光抗体封存液。
9.一种荧光抗体封存液的用途,其特征在于,按权利要求5的制备方法获得的权利要求2或3所述的荧光抗体封存液,用于将活化后的荧光染料抗体稀释后封存在心肌检测的自驱动微流控芯片的混合区内。
10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于,还包括,
第一步,将荧光染料与抗体按质量比1∶1~1∶10混合后,在37℃条件下反应20min~40min;
第二步,通过透析或纯化的方式去除多余的荧光染料;
第三步,用权利要求2或3所述的封存液稀释到0.2mg/ml的抗体浓度。
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