[发明专利]一种阿拉善地区野生苜蓿组培苗培养方法

权利要求书

1.一种阿拉善地区野生苜蓿组培苗培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）外植体的选择：

外植体选择野生苜蓿的花苞；

（2）外植体的消毒：

先用洗衣粉水清洗1min，再用无菌水清洗3次，75%酒精消毒30s，升汞溶液消毒3min，最后使用无菌水清洗5次；

（3）愈伤组织的诱导培养：

将消毒处理后的外植体置入诱导培养基进行诱导培养，最佳初代培养基为添加了0.2mg/L6-BA、0.1mg/L NAA、0.5mg/L 2,4-D-丁酯和0.5mg/LAC的MS培养基；所述AC为活性炭；

（4）愈伤组织继代培养：

将诱导培养的愈伤组织置入继代培养基进行培养；最佳继代培养基为添加了0.2mg/L6-BA 、0.1mg/L KT 和0.1mg/L NAA的改良MS培养基；

所述改良MS培养基为在MS基础培养基的基础上，Ca、Mg和Mn各自减半；

（5）生根培养：

将步骤（4）得到的组织置入生根培养基中，进行生根培养，得苜蓿幼苗；最佳生根培养基为添加了0.5mg/L 6-BA 和0.5mg/L活性炭的1/2改良MS培养基；

所述1/2改良MS培养基为：在1/2MS培养基基础上Ca²⁺和Mg²⁺减半。

2.根据权利要求1所述的阿拉善地区野生苜蓿组培苗培养方法，其特征在于，外植体大小为0.27mm。

3.根据权利要求1所述的阿拉善地区野生苜蓿组培苗培养方法，其特征在于，步骤（3）的诱导培养的条件为：培养周期为16天；温度20-22℃，湿度55%，光照条件2500lx ，16天后外植体切口部位诱导出愈伤组织。

4.根据权利要求1所述的阿拉善地区野生苜蓿组培苗培养方法，其特征在于，步骤（4）的继代培养的条件为：温度20-22℃，湿度55%，光照条件2500lx；培养周期为25天。

5.根据权利要求1所述的阿拉善地区野生苜蓿组培苗培养方法，其特征在于，步骤（5）的生根培养条件：温度25℃，湿度60%，光照强度2500lx，光照时间11h，黑暗13h，培养周期为25天。