[发明专利]基于褐菖鲉评估有对照站位石油类生物毒性效应的方法

说明书

本发明涉及一种基于褐菖鲉评估有对照站位石油类生物毒性效应的方法，包括以下步骤：(1)采用海区原位监测实验，设置若干个石油类污染监测站位和一个清洁的对照站位；(2)将健康褐菖鲉用网框悬挂于不同监测站位；(3)监测持续14天，在最后一天观察褐菖鲉存活情况、取存活褐菖鲉的肝、胆、性腺组织进行生理生化检测；(4)将海洋石油类生物毒性效应分为五级；(5)基于各分子生物标志物的分级系数和第二代综合生物标志物响应指数，得出一至三级的分级阈值；(6)分析评估有对照站位的海洋石油类生物毒性效应风险等级。本发明具有方法简便，原材料来源广、成本低、易操作、效应显著等优点，能定量评价海洋石油类污染对海洋生物和生态系统安全。

技术领域

本发明涉及海洋石油类污染评估技术领域，具体涉及基于褐菖鲉评估有对照站位石油类生物毒性效应的方法。

背景技术

石油类不仅是全球也是我国海洋环境最主要的污染物之一。其主要来源于工业排放，船舶运输、海上石油开采和溢油事故等。近年来，我国海洋污染快速蔓延的势头虽然得到了一定程度的减缓，但局部海域石油类污染仍较严重。可以预见，随着我国工农业生产的高速发展、城市化进程加快，海上运输和捕捞业持续发展，海洋石油勘探和开发突飞猛进，溢油事故时有发生，石油类仍将是我国近海海域数量大、危害严重的主要污染物之一。

海洋鱼类作为海洋生态系统的高级营养级，对环境污染的响应具有不可替代的作用，因此基于鱼类对环境污染物进行生物监测能更直观反应环境污染状况。褐菖鲉广泛分布于西太平洋沿岸海域，包括日本、朝鲜，我国、越南和菲律宾，在我国的的渤海、黄海、东海和南海均有分布，是一种暖温性近海底层鱼类，栖息于水质清澈的近岸岩礁附近，卵胎生，每年的2～5月份为繁殖季节。褐菖鲉抗病能力强、取材方便且在室内易于驯化，也是一种十分适合于开展野外监测的鱼类。因此，褐菖鲉是开展海洋石油类生物毒性效应评估的理想海洋鱼类。

EROD(7-乙氧基异吩噁唑-O-脱乙基酶)和胆汁荧光芳烃组分因其特异性较强、效应快、灵敏度高已经成为海洋石油类及多环芳烃生物监测中的重要指标，得到许多国际组织的认可，开展了越来越多的研究和应用。

目前，对于有对照站位的海洋石油类生物毒性效应评估，大多是通过分子生物标志物的响应差异来评估毒性效应的大小。综合生物标志物响应指数法(IBR)是由Beliaeff和Burgeot (Beliaeff B,Burgeot T.Integrated biomarker response：a useful toolfor ecological risk assessment. Environmental Toxicology and Chemistry,2002,21(6)：1316-1322)建立的一种基于多种生物标志物反应的生态环境健康状况综合评价的方法。该方法利用星状图表示每个站位上各种生物标志物测定结果的赋值，通过计算星状图面积得到某个站位的IBR值，具有可视化优点，能够很好地区分不同站位的污染水平。然而，这个方法还存在某些不足，比如星状图中由于标志物排序不同会造成IBR计算偏差；此外，考虑到多种生物标志物在不同污染条件下可能会出现诱导或抑制作用，这在第一代IBR的星状图中无法体现出来。基于以上的问题，Sanchez 等(Sanchez,W.,Burgeot,T.,Porcher,J.M.A novel“Integrated Biomarker Response”calculation based onreference deviation concept.Environ.Sci.Pollut.Res.2013,20(5),2721–2725)引入了“对照偏离”的概念，对第一代IBR方法进行了改进，克服了不足，因此该方法称之为第二代综合生物标志物响应指数法(IBRv2)。IBRv2应用的前提条件是需要选择清洁站位作为对照， IBRv2不仅适用于大尺度的生物监测项目，更适用于河流排污口上下游等有明确对照站位的污染程度分析比较。该方法最近已经开始用于海湾石油类污染生物效应评价，但是仅通过比较IBRv2值的大小来定性评估石油类污染生物效应状况，尚未有基于IBRv2定量评估有对照站位的海洋石油类生物毒性效应的评估方法。

发明内容