[发明专利]用于合成咖啡酸的构建体，载体和蓝细菌以及在蓝细菌中生产咖啡酸的方法在审
| 申请号： | 202111344242.9 | 申请日： | 2021-11-15 |
| 公开（公告）号： | CN114134166A | 公开（公告）日： | 2022-03-04 |
| 发明（设计）人： | 邱海燕;吴军华;高恶斌 | 申请（专利权）人： | 宁波市妇女儿童医院 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/65;C12N15/67;C12N15/60;C12N15/53;C12N1/21;C12P7/42;C12R1/01 |
| 代理公司： | 宁波甬致专利代理有限公司 33228 | 代理人： | 李魏 |
| 地址： | 315012 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 合成 咖啡 构建 载体 细菌 以及 生产 方法 | ||
1.一种用于合成咖啡酸的构建体，其特征在于，包含有：
在蓝细菌中具有活性的启动子，以及处于该启动子控制之下的苯丙氨酸酶基因、肉桂酸-4-羟化酶基因和对香豆酸-3-羟化酶基因三个基因，其中苯丙氨酸酶基因序列如SEQ IDNO.5所示，肉桂酸-4-羟化酶基因序列如SEQ ID NO.6所示，对香豆酸-3-羟化酶基因序列如SEQ ID NO.7所示。
2.根据权利要求1所述的用于合成咖啡酸的构建体，其特征在于：其包含有处于所述在蓝细菌中具有活性的启动子上游的用于筛选蓝细菌转化体的标记基因。
3.根据权利要求2所述的用于合成咖啡酸的构建体，其特征在于：所述标记基因为壮观霉素抗性基因片段，所述壮观霉素抗性基因片段序列如SEQ ID NO.3所示。
4.根据权利要求1所述的用于合成咖啡酸的构建体，其特征在于：其在两端具有集胞藻PCC6803的slr2081基因的N-末端序列和C-末端序列，以用于同源重组。
5.根据权利要求1所述的用于合成咖啡酸的构建体，其特征在于：在所述蓝细菌中具有活性的所述启动子为Pcpc560。
6.根据权利要求1-5任一所述的用于合成咖啡酸的构建体，其特征在于：所述蓝细菌为集胞藻PCC6803。
7.一种载体，其特征在于：其包含权利要求1-6任一所述的用于合成咖啡酸的构建体。
8.一种蓝细菌，其特征在于，用权利要求7所述的载体转化得到。
9.一种蓝细菌，其特征在于：其包含权利要求1-6任一所述的用于合成咖啡酸的构建体。
10.一种在蓝细菌中生产咖啡酸的方法，其特征在于，所述方法包括：
在合适于合成咖啡酸的条件下培养权利要求8或9中的蓝细菌；以及
从所获得的培养物中提取所述的咖啡酸。
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