[发明专利]一种快速评价藜麦穗发芽抗性的方法

说明书

本发明公开了一种快速评价藜麦穗发芽抗性的方法，包括如下步骤：制备籽粒萌发培养基、制备水活度不同的培养基、采集成熟藜麦穗、籽粒发芽试验、籽粒发芽测定、抗性评价。本发明的穗发芽抗性综合指数（RI）加权了藜麦籽粒在不同水活度情况下发芽率能更为客观的反应藜麦品种对穗发芽的抗性，具有结果精准、省时省力，重复性好、稳定可靠等特点。

技术领域

本发明属于植物保护技术领域，具体涉及一种快速评价藜麦穗发芽抗性的方法。

背景技术

近年来，藜麦风靡全球。基于其应对气候变化、维护粮食安全及营养特性优异等潜力，联合国宣布2013年为国际藜麦年。目前，全球种植藜麦的国家约90个，遍布世界各大洲。藜麦产业在我国的发展势头强劲，已经成为小杂粮作物的后起之秀，主要种植省份有甘肃、内蒙古、山西、云南、青海、河北等。预计到2025年，国内藜麦消费需求将超10万吨，藜麦也势必会成为重要得粮食作物。随着种植面积的扩大，藜麦穗发芽日趋严重，严重影响着藜麦产业的发展。研究发现，由于藜麦籽粒小（千粒重约2.5～4.5 g），胚芽十分发达、种皮薄且易溶于水，籽粒成熟后，遇雨极易发芽。2019-2021年调研发现，藜麦穗发芽是一种普遍现象，特别是在收获季节遇到阴雨天气，严重的地块穗发芽率达到75％~90%。穗发芽严重影响产量和品质，造成藜麦的收储困难以及商品藜麦的价格下降。藜麦种植区收获季节的气候属于不可控制因素，种植穗发芽抗性品种是防治穗发芽的根本措施。如何快速鉴定优质抗穗发芽的藜麦种质资源是当前藜麦工作者关注的焦点之一。因此精准鉴定、系统理清穗发芽抗性持续期长的藜麦品种不仅十分必要，而且极为迫切。

目前鉴定藜麦穗发芽抗性的方法主要有田间延期收获法、整穗发芽法、籽粒发芽法等，然而这些方法存在的问题主要有：（1）田间延期收获法和整穗发芽法由于藜麦植株高大、穗型巨大（达到1.5 m~2.0 m品种比比皆是），实际操作中都有局限性，很难精准控制实验的精度、数据重复性低。（2）传统整穗发芽法和籽粒发芽法，每次只能做一个湿度梯度，不能模拟不同的湿度梯度；加之试验期间容易腐烂、滋生杂菌，为整个实验带来很多不确定因素。（3）传统评价是将藜麦整体放入人工气候培养箱，然而绝大多数人工气候培养箱的湿度误差较大，导致抗病性鉴定不准确。（4）自然界中穗发芽是一个动态的过程，环境中能被藜麦籽粒利用的自由水是动态的，而不是一层不变。然而，传统评价方法v是将环境中自由水固定在一个值进行评价，不能精准评价藜麦籽粒对环境可中利用自由水的敏感性，湿度很难精准控制、结果重现性低。因此，如何精准控制藜麦籽粒可利用的自由水对于鉴定穗发芽抗性至关重要。鉴于上述缺陷，亟待研发一种结果精准、时间短、稳定可靠的评价藜麦穗发芽抗性的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速评价藜麦穗发芽抗性的方法，以解决背景技术中提出的问题。为实现上述目的，本发明公开的技术方案如下：

本发明的快速评价藜麦穗发芽抗性的方法，具体步骤为：

（1）制备籽粒萌发培养基：每1 L的蒸馏水中加入2%~5%质量的藜麦籽粒壳，熬煮25~30 min，然后过滤取上清液，在上清液中加14~17 g琼脂加热溶解，分装于三角瓶，121℃高压灭菌15~20 min，冷却后在0~4℃下冷藏，备用。

（2）制备水活度不同的培养基：将步骤（1）准备好的籽粒萌发培养基加热融化、再冷却至40~50℃时，取100 ml培养基装于200-500ml的无菌三角瓶，重复6次，再在6个三角瓶中分别添加0、14.3、19.3、21.8、29.3和34.3 ml的甘油，趁热充分搅拌混匀，制成水活度分别为1.00、0.98、0.96、094、0.92、0.90的六种不同水活度的培养基，将配置好的培养基趁热倒入直径90 mm的培养皿中，每个培养皿倒8~12 mL，每个水活度重复3~5次。