[发明专利]一种高抗氧化活性的啤酒酵母多肽制备方法及应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，提出了一种高抗氧化活性的啤酒酵母多肽制备方法，包括以下步骤：(1)啤酒酵母自溶：啤酒酵母加入NaHCO₃去除啤酒花，依次使用风味蛋白酶、乳酸菌和麦芽糖实现啤酒酵母的自溶；(2)酶解：采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶共同酶解；(3)灭酶、除核酸：灭酶后采用等电点法去除核酸；(4)脱色即得啤酒酵母多肽。本发明通过风味蛋白酶、乳酸菌共同对啤酒酵母自溶，大大提高了自溶的效果和效率，使酵母细胞内蛋白质迅速外流，为后续水解制备啤酒酵母多肽提供有利条件，大大提高了啤酒酵母多肽的产率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体的，涉及一种高抗氧化活性的啤酒酵母多肽制备方法及应用。

背景技术

啤酒生产工业会产生大量啤酒废酵母，虽然废酵母的活性有所下降，但是其中富含丰富的营养物质，例如蛋白质、核酸、矿物质、纤维素等。其中，蛋白质含量高达50％，氨基酸种类齐全，其比例接近联合国粮农组织(FAO)推荐比例，尤其是谷类食物中第一限制氨基酸赖氨酸含量丰富，具有潜在的应用价值。

我国是一个啤酒生产和消费大国，每年产生的啤酒废酵母约5万吨。这些啤酒废酵母除了部分经粗加工制成饲料等低附加值产品外，大部分被直接排弃，不但浪费了资源，还造成了环境的污染。如果能对啤酒废酵母进行合理的开发利用，对综合利用资源和环保都具有非常重要的意义。

专利申请CN 106701871 A和CN 106676152 A分别公开了一种利用啤酒废酵母制备多肽的方法，分别采用木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶进行蛋白质水解得到粗多肽后再进行进一步除杂纯化，但是这两个专利申请中对啤酒废酵母的预处理仅仅采用NaHCO3对啤酒花进行了酯化，并未实现啤酒废酵母的自溶，因此后续直接的酶解反应效率较低，得到多肽的产率也较低。

发明内容

本发明提出一种高抗氧化活性的啤酒酵母多肽制备方法，使用风味蛋白酶和乳酸菌共同处理啤酒酵母实现啤酒酵母的自溶，为后续蛋白质水解提供有利条件，显著提高多肽的收率。

本发明的技术方案如下：

一种高抗氧化活性的啤酒酵母多肽制备方法，包括以下步骤：

(1)啤酒酵母自溶：啤酒酵母加入NaHCO₃溶液，离心，沉淀加无菌水后，加入风味蛋白酶，灭酶后再加入乳酸菌和麦芽糖，离心，保留上清液；

(2)酶解：向步骤(1)上清液中加入木瓜蛋白酶和胰蛋白酶进行酶解；

(3)灭酶、除核酸：煮沸灭酶，离心，上清液用等电点法去除核酸，离心，保留上清液；

(4)脱色：步骤(3)上清液中加入脱色剂，离心，上清液浓缩干燥，即得。

进一步地，所述步骤(1)中NaHCO₃溶液质量百分浓度为0.1-2％，体积是啤酒酵母质量的2-3倍，配制后灭菌。

进一步地，所述步骤(1)中啤酒酵母加入NaHCO₃溶液浸泡30-80min，3000-4000r/min离心15-20min。

进一步地，所述步骤(1)的沉淀中加无菌水，无菌水体积为沉淀质量的2-3倍。

进一步地，所述步骤(1)中风味蛋白酶的添加量为啤酒酵母质量的1-2‰，添加后于40-50℃反应6-8h。

进一步地，所述步骤(1)中灭酶条件为将溶液煮沸10-15min，冷却至室温。

进一步地，所述步骤(1)中乳酸菌选自嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、青春双歧杆菌、两歧双歧杆菌、嗜热链球菌中的一种或多种。