[发明专利]一株泰国伯克霍尔德菌、及其应用和发酵方法

说明书

一株泰国伯克霍尔德菌、及其应用和发酵方法。本发明提供了一株泰国伯克霍尔德菌(Burkholderiathailandensis)HDCC00029，于2021年07月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.22963。该菌株可以用于Thailanstatin A发酵生产，发酵效价最高可达4.07g/L，适合工业化生产。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株泰国伯克霍尔德菌、及其应用和发酵方法。

背景技术

泰兰他汀A(Thailanstatin A，TST-A)对多种人类癌细胞系具有纳米至亚纳米级细胞毒性。它的作用机制是与U2 snRNA亚复合物的SF3b亚基紧密结合，而U2 snRNA亚复合物是剪接体的重要组成部分，从而抑制剪接体组装。现研究已使用N-羟基丁二酰亚胺(NHS)酯基对TST-A修饰，并通过赖氨酸胺基与曲妥珠单抗偶联，产生了一个几乎“无连接”的ADC。曲妥珠单抗-TST已在体外HER2过表达细胞系中试验，并在N87细胞中显示出加速抑制剪接作用。此外，曲妥珠单抗-TST在低至1.5mg/kg剂量的条件下依然对胃癌异种移植有显著效力。此外，与美坦辛或单甲基奥司他汀E(MMAE)等微管抑制剂相比，以TST-A为基础的ADC对多药耐药(MDR)肿瘤表型具有很高的疗效。

2012年美国威斯康辛大学密尔沃基分校的研究员Xiangyang Liu从泰国伯克霍尔德菌Burkholderiathailandensis MSMB43中发现Thailanstatin A,B,C。2016年，美国莱斯大学有机合成化学家、美国科学院院士K.C.Nicolaou及其研究团队合成了ThailanstatinA，将相关研究结果发表在《Journal of the American Chemical Society》杂志。Eustáquio A S等在《Biosynthetic engineering and fermentation media developmentleads to gram-scale production of spliceostatin natural products inBurkholderiasp》中报道了通过基因改造菌种，采用优化过的培养基(在2S4G培养基中加入四环素类药物和L-阿拉伯糖)，经过5天的发酵最终使TST-A效价从0.347g/L提高到2.5g/L。

发明内容

为了得到一株具有更高效价，并适合产业化生产泰兰他汀A的菌株，本发明提供了一株泰国伯克霍尔德菌(Burkholderiathailandensis)HDCC00029，于2021年07月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC NO.22963。

本发明还提供了一种所述泰国伯克霍尔德菌HDCC00029的用途，用于制备泰兰他汀A(Thailanstatin A)和/或泰兰他汀D(Thailanstatin D)；

或者，用于制备含泰兰他汀A和/或泰兰他汀D的药品、保健品、食品、饮料、化妆品、添加剂、饲料中的一个或多个。

本发明还一种含有所述泰国伯克霍尔德菌HDCC00029的发酵液。

本发明还一种所述发酵液的用途，用于制备泰兰他汀A和/或泰兰他汀D；

或者，用于制备含泰兰他汀A和/或泰兰他汀D的药品、保健品、食品、饮料、化妆品、添加剂、饲料中的一个或多个。

本发明还一种用所述泰国伯克霍尔德菌HDCC00029生产泰兰他汀A和/或泰兰他汀D的发酵方法。

优选地，包括在含有可同化的碳源和/或氮源的发酵培养基里，进行发酵。