[发明专利]一种索马鲁肽保护氨基酸的合成方法及纯化方法

说明书

本发明属于生物医药技术领域，公开了一种索马鲁肽保护氨基酸的合成方法，包括如下步骤：步步骤一、氨基酸在二氧六环溶剂条件下，搅拌加入硫酸溶液、异丁烯，完全反应得到中间体I；步骤二、上步反应液在冰浴条件下，降温至0℃以下，加入氢氧化钠溶液，调节pH至9‑10，搅拌后反应完全得到中间体II；步骤三、上步反应液保持冰浴条件，加入Fmoc‑osu的二氧六环溶液，反应完全，采用稀盐酸酸化pH至3‑4，水相用乙酸乙酯溶液萃取，萃取后的有机相干燥，旋干，得到产物。同时还公开了一种该索马鲁肽保护氨基酸的纯化方法。

技术领域

本发明涉及一种索马鲁肽保护氨基酸的合成方法及纯化方法，属于生物医药技术领域。

背景技术

索马鲁肽是全球第一个也是唯一一个口服胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂药物，作为饮食控制和运动的辅助手段，以改善2型糖尿病成人患者的血糖控制。在全球糖尿病高发，患者对糖尿病药物需要长期依赖的情況下，口服药在给药途径上要比注射剂更易被患者接受，因为其在服药便捷之余，也能免去注射用药给患者带来的皮肤疼痛。因此索马鲁肽不仅具有市场价值，更具有社会意义。

Fmoc-Asp(Otbu)-OH和Fmoc-Glu(Otbu)-OH是生产索马鲁肽的基础保护氨基酸，其合成方法通常用叔丁醇在DCC和DMAP催化下分别和H-Asp-OH和H-Glu-OH反应，以实现远端羧基的保护。但反应中采用的叔丁醇保护效果不好，反应时间较长，且很难反应完全，产物极难分离提纯。我们拟对其合成工艺进行研发，通过工艺优化，降低生产成本，使得该基础氨基酸的生产工艺更具竞争优势。

发明内容

本发明目的在于提供一种索马鲁肽保护氨基酸的合成方法及纯化方法，本专利优化工艺，一方面可使反应顺利进行，大幅缩短反应时间。另一方面有利于产物的提纯，从而使成本显著降低，操作更加方便。

为达到上述目的，本发明采用下述技术方案实现：

本发明公开了一种索马鲁肽保护氨基酸的合成方法，包括如下步骤：

步骤一、氨基酸在二氧六环溶剂条件下，搅拌加入硫酸溶液、异丁烯，完全反应得到中间体I；

步骤二、上步反应液在冰浴条件下，降温至0℃以下，加入氢氧化钠溶液，调节pH至9-10，搅拌后反应完全得到中间体II。

步骤三、上步反应液保持冰浴条件，加入Fmoc-osu的二氧六环溶液，反应完全，采用稀盐酸酸化pH至3-4，水相用乙酸乙酯溶液萃取，萃取后的有机相干燥，旋干，得到产物。

本发明的进一步的技术方案是：步骤一中，氨基酸为天门冬氨酸或谷氨酸。硫酸是强酸之一，在本发明中，采用硫酸作为强酸，主要是因为在硫酸的条件下，实现加成反应的进行。

本发明的进一步的技术方案是：步骤三中，氨基酸为天门冬氨酸时，最佳反应条件为：-5度冰浴，反应时间为2h，中间体II与Fmoc-osu最佳投料比为1∶0.95。

本发明的进一步的技术方案是：步骤三中，氨基酸为谷氨酸时，最佳反应条件为：0度冰浴，反应时间为2.5h，中间体II与Fmoc-osu最佳投料比为1∶0.95。

本发明的进一步的技术方案是：步骤三中，萃取用的有机溶剂为乙酸乙酯。乙酸乙酯作为常规溶剂，不仅价格便宜、实用，在本发明中乙酸乙酯的效果好。

还公开了一种索马鲁肽保护氨基酸的纯化方法，包括如下步骤：步骤一，将上述制备方法得到的索马鲁肽保护氨基酸加入浓盐酸，于70-100摄氏度下搅拌，溶解，得到盐酸盐溶液；于15-25摄氏度下冷却结晶；步骤二，再加入有机溶剂，于70-100摄氏度下搅拌，洗涤，过滤得到高纯度盐酸盐溶液，步骤三，再加入有机溶剂，加入环氧丙烷解除盐酸，过滤，洗涤，得到高纯度索马鲁肽保护氨基酸。

本发明的进一步的技术方案是：所述步骤二中，有机溶剂为甲醇、乙腈得其中一种。