[发明专利]一种基于阻抗检测的数字PCR芯片及其检测方法在审
| 申请号： | 202111361961.1 | 申请日： | 2021-11-17 |
| 公开（公告）号： | CN114058686A | 公开（公告）日： | 2022-02-18 |
| 发明（设计）人： | 赵祥伟;谢鑫;葛芹玉;朱纪军 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/6837 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 金诗琦 |
| 地址： | 211102 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 阻抗 检测 数字 pcr 芯片 及其 方法 | ||
1.一种基于阻抗检测的数字PCR芯片，其特征在于：包括基底(1)，所述基底(1)上设置微孔(3)阵列，所述微孔(3)由微孔壁(2)隔离分开，所述微孔壁(2)内设有电极(4)和微球，所述微球表面设有DNA探针。
2.根据权利要求1所述的一种基于阻抗检测的数字PCR芯片，其特征在于：所述电极(4)与阻抗测量器(5)相连。
3.根据权利要求1所述的一种基于阻抗检测的数字PCR芯片，其特征在于：所述微孔(3)的直径为在1～100μm。
4.根据权利要求1所述的一种基于阻抗检测的数字PCR芯片，其特征在于：所述电极(4)为方形或圆形。
5.根据权利要求4所述的一种基于阻抗检测的数字PCR芯片，其特征在于：所述电极(4)的高为0.05～0.6μm，宽为0.1～1.5μm，间距为0.1～2μm。
6.根据权利要求6所述的一种基于阻抗检测的数字PCR芯片，其特征在于，所述微孔壁内可以不存在微球，DNA探针可直接设置在微孔壁上。
7.根据权利要求1～6任一所述的一种基于阻抗检测的数字PCR芯片的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
(a)利用有DNA探针的微球捕获待测DNA靶序列，保证微球数目远远多于DNA靶序列；
(b)将微球和PCR反应液装配到微孔阵列中，保证一个微孔(3)中最多只有一个微球，检测当前状态下的阻抗值；
(c)反应结束后，等待温度回归室温之后进行阻抗检测，通过比较微孔(3)中微球表面PCR反应前后的阻抗变化，测量微球表面是否结合有DNA靶序列；
(d)通过数字PCR计算对DNA靶序列进行绝对定量检测。
8.根据权利要求7所述的一种基于阻抗检测的数字PCR芯片的检测方法，其特征在于：所述DNA探针为羧基探针，能够与待测DNA靶序列结合，进行核酸提取与检测。
9.根据权利要求7所述的一种基于阻抗检测的数字PCR芯片的检测方法，其特征在于：所述微孔(3)内加入脱氧核苷酸、DNA聚合酶和引物。
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