[发明专利]气相色谱-氢焰检测器定量分析烟叶11种酰胺生物碱方法

说明书

本发明涉及气相色谱‑氢焰检测器定量分析烟叶11种酰胺生物碱方法，通过氢氧化钠溶液浸泡使酰胺生物碱从烟末样品基质中游离出来，通过甲基叔丁基醚的萃取将目标化合物转入醚层，取甲基叔丁基醚萃取液浓缩后进行气相色谱‑氢火焰离子检测器分析，将仪器获得的色谱峰面积输入对应的酰胺生物碱的标准校准曲线拟合方程，得到对应的目标化合物浓度，通过换算得到对应的酰胺生物碱在烟叶中的含量。该方法可同时定量分析11种酰胺生物碱，具有简单、快速、稳定等优势。填补了目前不存在定量分析烟叶中11种酰胺生物碱的方法的空白，在此基础上可发展多种应用。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及基于气相色谱-氢火焰离子检测器的烟叶中11种酰胺生物碱的同时定量分析方法及烟叶分析方法。

背景技术

由于烟叶中的安全和品质与人类的健康息息相关，因此烟草中各类成分的研究一直深受人们的重视，但由于烟草的生产加工和储存中化学反应比较复杂，其中的化学物质的变化复杂多样，因此很多成分并没有清楚的认识。目前已有研究发现烟草中与去甲基尼古丁相关的化合物酰胺生物碱，但其定量分析方法和应用尚没有开发。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供一种气相色谱-氢火焰离子检测器定量分析烟叶中11种酰胺生物碱方法，通过氢氧化钠溶液浸泡使去甲基尼古丁及其酰基代谢物从样品基质中游离出来，通过加入甲基叔丁基醚的萃取将目标化合物转入醚层，取甲基叔丁基醚层后进行气相色谱-氢火焰离子检测器分析，可同时测定烟叶中11种酰胺生物碱的含量，进而通过酰胺生物碱的含量对烟叶进行分析。

本发明的技术方案：

一种气相色谱-氢焰检测器定量分析烟叶11种酰胺生物碱方法，其特征在于通过氢氧化钠溶液浸泡使酰胺生物碱从烟末样品基质中游离出来，通过甲基叔丁基醚的萃取将目标化合物转入醚层，取甲基叔丁基醚萃取液浓缩后进行气相色谱-氢火焰离子检测器分析，将仪器获得的色谱峰面积输入对应的酰胺生物碱的校准曲线方程，得到对应的目标化合物浓度，通过换算得到对应的酰胺生物碱在烟叶中的含量。

优选的，包括以下步骤：

步骤一、样品前处理：通过氢氧化钠溶液浸泡释放所述烟末样品基质中的酰胺生物碱，采用甲基叔丁基醚萃取释放的酰胺生物碱，通过对所述甲基叔丁基醚萃取液进行浓缩使目标酰胺生物碱能被仪器检测到；

步骤二、确定仪器分析条件，包括色谱条件和检测器条件；

步骤三、标准曲线绘制，得到11种酰胺生物碱的的标准曲线拟合方程和线性相关系数；将步骤一中的所述甲基叔丁基醚萃取液的浓缩液按照步骤二的条件进行气相色谱-氢火焰离子分析，得到实际烟叶样品中酰胺生物碱的色谱峰面积，输入对应的所述标准曲线拟合方程，得到对应的目标化合物浓度，通过换算得到对应的酰胺生物碱在烟叶中的含量。

进一步优选的，所述步骤三包括以下步骤：

S31、标准溶液配制：分别称取去甲基尼古丁的11种酰基代谢物100mg置于不同的10mL容量瓶，甲基叔丁基醚定容，配成10mg/mL的单标储备液，分别取1mL 10mg/mL的单标储备液至同一个100mL容量瓶，甲基叔丁基醚定容，配制成100ug/mL的混标溶液；以此混标为标准曲线浓度上限，逐级稀释混标溶液10次，每次稀释为原来的1/2浓度，配制成11个不同浓度的标准混合溶液；

S32、按照步骤二所设定的条件采用气相色谱-氢火焰离子检测器进行分析，得到每个浓度梯度样本对应的色谱质谱峰面积，并将得到的峰面积和其对应的浓度梯度进行线性拟合，得到校准曲线拟合方程和线性相关系数；

S33、将步骤一中的所述甲基叔丁基醚萃取液的浓缩液按照步骤二的条件进行气相色谱-氢火焰离子检测器分析，得到实际烟叶样品中所含酰胺生物碱的色谱峰面积，输入对应的所述校准曲线拟合方程，得到对应的物质浓度，单位ug/mL；

S34、通过公式(1)换算得到对应的酰胺生物碱在烟叶中的含量：