[发明专利]一种生物耗材人基因组残留量的检测方法

权利要求书

1.一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1，制备待检测材料阶段，随机抽取n（n≥3）件送检耗材并对其称重，稀释处置后备用；

S2，制备检测对照组阶段，制备待检组、阴性对照组和阳性对照组；

S3，PCR扩增阶段；

S4，检测阶段，通过ABI7500荧光定量PCR仪中进行检测待检测材料中的荧光量；

S5，重复检测阶段，制备不同浓度梯度的阳性对照组并重复步骤S2-S5；

S6，判定阶段，通过与阳性对照组比对荧光信号强度，判断待检测材料中是否含有人基因组。

2.根据权利要求1所述的一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于：所述步骤S1中，制备待检测材料阶段，随机抽取n（n≥3）件送检耗材并对其称重，按照10ml/g加入超纯水进行稀释，将待检测材料放入无菌袋中，加入PCR纯净的灭菌超纯水。

3.根据权利要求2所述的一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于：所述处置方法为将待检测材料置于37℃水浴锅中1小时，结束后将待检测材料静置于室温中1小时候备用，记为待检水。

4.根据权利要求1所述的一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于：所述步骤S2中，制备待检组的制备方法为，将检测试剂加入待检水中，检测试剂包括，6μl的灭菌超纯水、10μl的2x qPCR SYBR GREEN Mix、长度为10μm的正向引物0.8μl、长度为10μm的反向引物0.8μl、0.4μl的ROX dye、重量为2pg的DNA模板2μl，试剂共计20μl。

5.根据权利要求4所述的一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于：所述制备阴性对照组设置为将检测试剂加入灭菌超纯水中，所述灭菌超纯水体积与所述待检水体积相同。

6.根据权利要求5所述的一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于：所述制备阳性对照组设置为将检测试剂加入带有人基因组的灭菌超纯水中，所述灭菌超纯水体积与所述待检水体积相同。

7.根据权利要求1所述的一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于：所述步骤S2中，通过Pubmed（生物技术数据库）制备合适引物，所述正向引物设置为从5′向3′方向读出DNA正链的序列，所述反向引物即为下游引物且沿着正链进行延长。

8.根据权利要求1所述的一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于：所述步骤S5中，将检测试剂中的DNA模板依次分别设置为4pg、8pg、16pg和32pg进行重复检测。

9.根据权利要求1所述的一种生物耗材人基因组残留量的检测方法，其特征在于：所述步骤S6中，将待检组分别与阳性实验组和阴性实验组进行对照荧光信号强度，待检组无荧光信号则视为合格。