[发明专利]一种血小板裂解液及其制备方法和应用在审
申请号: | 202111386357.4 | 申请日: | 2021-11-22 |
公开(公告)号: | CN114058576A | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 李琴;王天云;杨永晓;樊振林;林艳;王小引;罗青;郑辉 | 申请(专利权)人: | 新乡医学院;河南普诺易生物制品研究院有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 | 代理人: | 周新楣 |
地址: | 453003 河南省新*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 血小板 裂解 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种血小板裂解液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将多份来源不同的健康人的抗凝全血混合、去除红细胞后,收集富血小板血浆;
2)将步骤1)中获得的富血小板血浆超声处理后,离心,收集第一上清液;
3)将所述第一上清液与氯化钙混合、静置后,收集第二上清液即为血小板裂解液。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述抗凝全血为5~200份。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述抗凝全血为40~100份。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述超声处理为间歇性超声处理:超声处理4~6s,停止4~6s,循环8~12次;所述超声处理的功率为150~250W。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述的离心的转速为4000~6000rpm,所述离心的时间为25~35min。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中所述氯化钙为氯化钙溶液,所述氯化钙溶液的浓度为0.1~0.3g/ml;所述氯化钙溶液与第一上清液的体积比为1:90~110。
7.根据权利要求1或6所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中所述静置的温度为3~5℃,所述静置的时间为1.5~2.5h。
8.权利要求1~7任意一项所述的制备方法制备获得的血小板裂解液。
9.权利要求8所述的血小板裂解液在细胞培养中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述细胞包括间充质干细胞;所述血小板裂解液在细胞培养基中的体积百分比为1%~3%。
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