[发明专利]一种粪肠球菌穿梭质粒载体及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 202111388586.X | 申请日： | 2021-11-23 |
| 公开（公告）号： | CN113999867A | 公开（公告）日： | 2022-02-01 |
| 发明（设计）人： | 张小蒙;李凤;吴红雁 | 申请（专利权）人： | 江苏医药职业学院 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/65;C12N1/21;C12R1/01 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 224005 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 球菌 穿梭 质粒 载体 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种粪肠球菌穿梭质粒载体，其特征在于，所述粪肠球菌穿梭质粒载体的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.权利要求1所述的粪肠球菌穿梭质粒载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）以粪肠球菌质粒pLW4为模板，通过引物P1和P2进行PCR，得到线性化pLW4质粒，纯化后回收该线性化pLW4质粒；所述粪肠球菌质粒pLW4的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；P1的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，P2的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；
（2）用T4连接酶将纯化回收后的线性化pLW4质粒和载体pMD20进行连接；
（3）将连接产物转化至大肠杆菌感受态细胞，挑取转化子，提取得到所述穿梭质粒载体。
3.权利要求1所述的穿梭质粒载体的应用。
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