[发明专利]一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法

权利要求书

1.一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)选取薄皮核桃的带青皮的饱满、无病虫害、无明显机械损伤的健康果实；

(2)将果实清洗后备用；

(3)将清洗后的果实用质量浓度为75％的酒精溶液消毒；

(4)将消毒后的、带着酒精的果实转入超净台中，切去部分青皮，撬开青皮和种壳，取种胚接种至培养基中进行培养。

2.根据权利要求1所述的一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，所述步骤(1)中带青皮果实为种壳已经硬化或半硬化的带青皮果实。

3.根据权利要求1所述的一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，所述步骤(2)中清洗后需要擦干。

4.根据权利要求1所述的一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，步骤(3)所述用质量浓度为75％的酒精溶液消毒为密闭消毒5～20min，期间适当摇晃。

5.根据权利要求1所述的一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，步骤(4)的具体操作为：将消毒后的果实从酒精溶液中捞出，带着酒精，从超净台入口处直接转入超净台内的、无菌的托盘中，切去果柄处部分青皮露出种壳，用无菌的开壳器撬开青皮和种壳，选饱满、洁白、无病虫、不带子叶的种胚接种。

6.根据权利要求1所述的一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，步骤(4)所述培养基为在DKW培养基中加入如下质量浓度的组分：6-BA 0.3～0.8mg·L^-1、IBA 0.1～0.3mg·L^-1、蔗糖25～30g·L^-1和琼脂5.5～6.0g·L^-1，所述培养基的pH为5.8～6.2。

7.根据权利要求1所述的一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，所述步骤(4)中培养条件为暗培养5d后，转至自然光下培养，光照时间12～18h/d，培养温度为25±2℃。

8.根据权利要求1所述的一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，培养期间，统计种胚的污染率、褐化率、褐死率、存活率，观察种胚的生长情况。

9.根据权利要求8所述的一种薄皮核桃的带青皮果实中种胚的接种方法，其特征在于，所述污染率、褐化率、褐死率和存活率的计算公式如下：