[发明专利]一种大批量、快速研磨植物组织的方法在审
申请号: | 202111393950.1 | 申请日: | 2021-11-23 |
公开(公告)号: | CN114075561A | 公开(公告)日: | 2022-02-22 |
发明(设计)人: | 陈越;李婷婷;丁铭;钟静 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C12M1/00 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 戴嵩玮 |
地址: | 650201 云南省昆*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大批量 快速 研磨 植物 组织 方法 | ||
1.一种大批量、快速研磨植物组织的方法,其特征在于,包括以下步骤:
将植物组织样品和灭菌小球放入已灭菌且无核酸酶的圆底离心管中,盖上圆底离心管的盖子,置于装有液氮的耐低温容器中,封闭耐低温容器口预冷1~2min;
所述预冷后倒出耐低温容器中的液氮,再次封闭耐低温容器口,摇甩耐低温容器若干次,得研磨样品。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述摇甩的方式包括:使所述耐低温容器处于初始方位,手动上下以每秒3次的速度摇甩所述耐低温容器,摇甩6秒后,在水平面内使所述耐低温容器至少产生一次旋转,以转换到至少一个研磨方位上,继续手动上下以每秒3次的速度摇甩所述耐低温容器,摇甩6秒;所述每秒3次以手动连续一上一下为1次。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,通过更换手固定位置实现所述低温容器在初始状态与研磨方位之间的转换;当所述耐低温容器为立方体形时,在四个侧面分别选取手所固定位置,确定四个手持位置;更换摇甩固定位置的次数为4~8次。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述耐低温容器中,所述液氮的液面高度与所述低温容器高度的比值为3:4。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,单个圆底离心管中灭菌小球的个数为1~2个,所述灭菌小球的直径为4~6mm。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述灭菌小球为将小球进行灭菌得到;所述灭菌前,使用体积浓度为75%的酒精浸没小球1h。
7.根据权利要求1~6任一项所述的方法,其特征在于,所述小球为不锈钢小球。
8.权利要求1~7任一项所述方法得到的研磨样品在提取植物组织DNA和/或RNA中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,当用于提取植物组织RNA时,所述灭菌小球的获得方法还包括:使用体积浓度为75%的酒精浸没小球后,灭菌前,使用RNA酶抑制剂浸没小球12h;所述RNA酶抑制剂包括焦碳酸二乙酯。
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