[发明专利]一种分析刺梨中农药残留的QuEChERS-UPLC-MS/MS方法

说明书

本发明公开一种经济、快速、灵敏、准确的可同时测定刺梨中11种常用农药残留的分析方法。样品经粉碎后，用经优化的QuEChERS法进行前处理，乙腈作为提取剂，N‑丙基乙二胺+石墨化碳黑作为净化剂，结合超高效液相色谱‑串联质谱仪分析。采用Agilent Eclipse Plus C₁₈柱进行分离，0.1％甲酸水‑乙腈作为流动相，梯度洗脱，以电喷雾正离子多反应监测模式检测，外标法定量。经方法验证，11种农药的方法检出限在1.31～8.56μg/kg之间，定量限在4.13～43.57μg/kg之间，线性相关系数(R)在0.9912～0.9999之间。本方法选择3个浓度水平进行添加回收率实验，平均加标回收率在84.54％～103.81％之间，相对标准偏差(n＝6)在1.15％～8.46％之间。该方法前处理快速、灵敏、准确，可为刺梨中农药的监管提供技术支持。

技术领域

本发明涉及分析化学及农产品安全技术领域，主要涉及刺梨中多种农药残留的测定技术，具体涉及一种分析刺梨中农药残留的QuEChERS-UPLC-MS/MS方法。

背景技术

刺梨(Rosa roxburghii Tratt)学名缫丝花，属蔷薇科蔷薇属植物，又名山王果、刺莓果、佛朗果、茨梨、木梨子，别名刺菠萝、送春归、刺酸梨子、刺梨蔷薇、九头鸟、文先果、刺石榴(陕西)，是一种稀有的、滋补健身的营养珍果。主要以贵州、四川、云南、湖北、湖南分布面积大，产量多，其中贵州省的野生刺梨分布最多，也是该省特有的优势资源。刺梨果实富含多种维生素，氨基酸和微量元素以及胡萝卜素、有机酸、黄酮、β-谷甾醇、超氧化物歧化酶(SOD)等，其中，每100g刺梨果肉中，含维C含2054～2725mg、维P含5980～12895mg、SOD32100U，远超过猕猴桃、柑橘、树莓等水果，是当之无愧的“维C之王”和“三王之果”，也是目前世界上第三代水果之冠。

近年来，随着刺梨栽培面积的不断扩大，各种病害如刺梨白粉病、褐斑病、烟煤病、茎腐病、病毒病等，虫害如梨小食心虫、小实蝇、蚜虫、粉虱、介壳虫等，杂草如马塘，酢浆草、牛筋草，狗尾草、马齿苋等病虫草害问题逐渐凸显。虽然中国农药信息网并未登记有农药可在刺梨生产上使用，但通过对贵州刺梨主产区进行调研发现，果农为了保产，常使用苯醚甲环唑、吡虫啉、吡唑醚菌酯、敌草隆、啶虫脒、多菌灵、腈菌唑、氯虫苯甲酰胺、醚菌酯、嘧菌酯、三唑酮等杀虫剂、杀菌剂以及除草剂以达到快速防治病虫草的目的。在即将实施的GB2763-2021《食品中农药最大残留限量》标准中也未规定有关刺梨的农药最大残留限量，所以上述农药在刺梨生产上长期施用，是否会有残留，残留量的多少以及对刺梨的质量安全会不会造成影响，都有待研究。因此，有必要发明一种刺梨上常用农药快速分析方法，为刺梨上农药的使用、监管提供技术支撑。

目前，水果中常用的农药检测方法有气相色谱法、气相色谱-串联质谱法、液相色谱法、液相色谱-串联质谱法。常用的样品前处理技术有QuEChERS法，固相微萃取法，微波萃取法等，其中QuEChERS法从诞生之初就被用作果蔬中农药残留的前处理方法，由于其快速简便的特点，逐渐被推广至更大的检测范围和基质中，成为了农药残留快速前处理技术的首选。QuEChERS法如今已广泛应用于色谱-串联质谱分析果蔬中农药残留的研究。目前已有文献报道气相色谱-串联质谱法分析刺梨中多种有机氯农药残留的研究，但根据实际调研结果来看，有机氯类农药在刺梨生产上并不常用，而且气相色谱不易分析一些极性强、热稳定性差的农药，所以急需建立一种可靠性高、稳定性好、检测范围广的液相色谱-串联质谱法。同时由于刺梨样品基质复杂，含有较多的维生素、SOD、有机酸以及刺梨苷和黄酮类活性物质，会对农药的提取产生干扰，提取率低，并会产生较强的基质干扰而对检测结果的准确性产生影响，导致刺梨中农药残留的提取和净化更复杂，所以常规的QuEChERS方法已不能满足刺梨中农药残留检测的需求。本发明拟在充分调研刺梨果农目前普遍在用农药的基础上，通过优化QuEChERS前处理方法和测定条件，结合超高效液相色谱-串联质谱检测，建立一种同时快速检测刺梨中11种农药的多残留分析方法，本发明的方法操作简便、分析时间短、快速、灵敏度高、可满足刺梨生产中常用农药残留的定量检测需要。

发明内容