[发明专利]一种阿法骨化醇片溶出度的检测方法

说明书

本发明公开了一种阿法骨化醇片溶出度的检测方法，所述方法包括：（1）采用《中国药典》收载的小杯法，并在溶出介质中加入少量解吸附物质SDS，（2）采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以甲醇和水组成为流动相。该方法专属性强、灵敏度高、精密度好且准确度高，操作简便、绿色、经济且普遍适用，对阿法骨化醇片的制备工艺具有良好的区分力，为阿法骨化醇片的质量和评价提供了可靠的分析手段。

技术领域

本发明涉及医药分析方法领域，具体涉及一种阿法骨化醇片溶出度的检测方法。

背景技术

阿法骨化醇化学名为(5Z,7E)-9,10-开环胆甾-5,7,10(19)-三烯-1α,3β-二醇，结构式如下：

阿法骨化醇可增加小肠和肾小管对钙的重吸收，抑制甲状旁腺增生，减少甲状旁腺激素合成与释放，抑制骨吸收，增加转化生长因子-B（TGF-B）和胰岛素样生长因子-I（1GF-I）合成，促进胶原和骨基质蛋白合成，调节肌肉钙代谢，促进肌细胞分化，增强肌力，增加神经肌肉协调性，减少跌倒倾向。

阿法骨化醇片用于治疗改善慢性肾功能不全、甲状旁腺功能低下和抗维生素D佝偻病、骨软化症患者因维生素D代谢异常的症状，如：低钙血症、抽搐、骨痛及骨损害和骨质疏松症。

目前，国际上仅有《中国药典》收载了阿法骨化醇片的质量标准，但没有对溶出度的检测进行规定。而在《中国药典》中同品种软胶囊（即阿法骨化醇软胶囊）的质量标准中同样没有对溶出度的检测进行规定。对于他骨化醇类药物，《中国药典》和USP中维生素D2（麦角骨化醇）及维生素D3（胆骨化醇）的口服固体制剂标准也均未制定溶出度检查项。而针对阿法骨化醇片的溶出度检测方法及相关研究也鲜有报道。

对于口服固体制剂，作为评价药物质量的重要手段，溶出度的研究具有重要意义。由于阿法骨化醇片的规格仅为0.25μg和0.5μg，其溶出度检测在灵敏度方面存在很大挑战，此外，由于阿法骨化醇脂溶性强，在溶出过程及取样过程中极易产生吸附损失，也对阿法骨化醇片溶出度的准确测定带来了极大挑战。

现有文献（Quantification of Alfacalcidol Tablets Dissolution Contentby Chemical Derivatization and LC-MS，Yang Liu等，Journal of Analytical Methodsin Chemistry，2020，1-6）公开了一种阿法骨化醇片溶出度的检测方法，其中的溶出液的制备采用的方法为：溶出装置为桨法，500ml pH6.8磷酸盐缓冲液（含0.1%SDS）为溶出介质，转速为每分钟50转，取样后溶出液经过滤、脱盐提取、加入内标物质再衍生化处理后，用液相-质谱联用技术（LC-MS）进行定量分析。该方法，前处理方法复杂，使用的溶剂多且具有较高毒性，对检测技术要求较高，不具有普遍适用性；此外，方法研究采用的溶出介质单一，不能对产品溶出特性进行系统全面的研究。

为改进现有技术的不足，需要针对阿法骨化醇片开发一种专属性强、灵敏度高、精密度好且准确度高，操作简便、绿色、经济且普遍适用的溶出度检测的方法，此外，该方法还应参照《普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则》采用多种不同pH的溶出介质进行考察研究。本发明人经过大量的测试条件的筛选研究，惊奇的发现通过改变溶出液的制备及检测方法，不但可以减少操作步骤，避免使用高毒性溶剂，还能够大大提高检测灵敏度，克服了现有技术存在的缺陷，并通过采用多种溶出介质，使该方法对阿法骨化醇片的研究更为系统全面，研究结果证明，本方法对阿法骨化醇片的不同制备工艺具有良好的区分力，为阿法骨化醇片的开发和评价提供了可靠的分析手段。

发明内容

本发明的目的在于建立一种阿法骨化醇片溶出度的检测方法，该方法能够专属、灵敏、准确、精密地对阿法骨化醇片的溶出液进行定量检测，在减少操作步骤、避免使用高毒性溶剂的同时，大大提高了检测灵敏度；通过采用多种溶出介质，使该方法对阿法骨化醇片的研究更为系统全面。

为实现本发明的目的，提供如下实施方案。