[发明专利]一种床旁快速检测HPV的LAMP引物组、试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种床旁快速检测HPV的LAMP引物组，其特征在于，包括如下核苷酸序列对组合：

。

2.根据权利要求1所述的床旁快速检测HPV的LAMP引物组，其特征在于，所述HPV包括亚型HPV16、HPV18、HPV33、HPV52、HPV56、HPV58和HPV68。

3.权利要求1-2中任意一项所述LAMP引物组在制备HPV检测试剂中的应用。

4.权利要求1-2中任意一项所述LAMP引物组在制备HPV检测试剂盒中的应用。

5.一种床旁快速检测HPV的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-2中任意一项所述LAMP引物组、裂解液和LAMP扩增体系。

6.根据权利要求5所述的床旁快速检测HPV的试剂盒，其特征在于，所述LAMP引物组总含量为1-5μM；

所述裂解液包括NaOH、Tris-HCl、SDS、Triton-X100、NP-40和尿素，其中，NaOH为5-20mM，Tris-HCl为1-5mM，SDS为0.05-1%，Triton-X100为0.1-2%，NP-40为1-10%，尿素为2-10mM，裂解液总体积为50μL；

所述LAMP扩增体系包括：MgSO₄、KCl、（NH₄）₂SO₄、Tween-20、betain、dNTPs、Bst3.0扩增酶和EVAgreen，其中，MgSO₄为5-10mM，KCl为25-125mM，（NH₄）₂SO₄为0-40mM，Tween-20为0.01-0.5%，betain为0.1-0.25M，dNTPs为1-5μM，Bst3.0扩增酶为0.2-1.0U，EVAgreen为0.5-1X，反应体系总体积为25μL。

7.根据权利要求5所述的床旁快速检测HPV的试剂盒，其特征在于，所述LAMP引物组中，包括内引物浓度为1.6-2.4μM，外引物浓度为0.1-0.4μM，环引物浓度为0.4-0.8μM；

所述裂解液包括5-10mM的NaOH、1-2mM的Tris-HCl、0.05-0.1%的SDS、0.5-1%的Triton-X100、1-5%的NP-40和4-6mM的尿素；

所述LAMP扩增体系包括6-7mM的MgSO₄、75-125mM的KCl、10-20mM的（NH₄）₂SO₄、0.1-0.4%的Tween-20、0.1-0.25M的betain、1-5μM的dNTPs、 0.5-1X的EVAgreen和0.2-1.0U 的Bst3.0扩增酶。