[发明专利]一种氟雷拉纳中间体肟酸的反相高效液相色谱分析方法

说明书

本发明属于分析领域，公开了一种氟雷拉纳中间体肟酸的反相高效液相色谱分析方法，通过使用乙腈水溶液溶解，之后以特定的反相高效液相色谱条件确定色谱图，根据色谱图计算出待测样品中氟雷拉纳中间体肟酸(4‑(羟基亚氨基)甲基)‑2‑甲基苯甲酸的含量。本发明提供的氟雷拉纳中间体肟酸的高效液相分析方法，检测灵敏度高，稳定性高，可靠性高，理论塔板数高，同时操作相对简单优点，能够有效测出氟雷拉纳中间体肟酸料肟酸含量，有利于保证氟雷拉纳中间体肟酸原料药及制剂的质量。

技术领域

本发明属于药物分析检测技术领域，具体涉及一种氟雷拉纳中间体肟酸的反相高效液相色谱分析方法。

背景技术

氟雷拉纳化学名为4-[5-(3，5-二氯苯基)]-4，5-二氢-5-三氟甲基-3-异噁唑基]-2-甲基-N-[2-氧代-2-[2.2.2-三氟乙基）氨基]]苯甲酰胺，是一种新型广谱性杀虫剂，是神经元中配体门控氯离子通道的有效抑制剂，对哺乳动物神经元和节肢动物神经元具有显著的选择性。氟雷拉纳的成功研发开创了一类全新的GABA门控氯离子通道干扰剂研究方向，与环戊二烯、类苯基吡唑类和大环内酯类等杀虫剂的作用靶标类似，对蜱目、蚤目、虱目、半翅目和双翅目等害虫具有良好的杀虫活性，其毒力高于或与常用杀虫剂相当，与其他同类杀虫剂相比，该药在分子结构、作用位点、选择性以及交互抗性等方面均有显著的差异，近年来，该药已被应用于犬、猫体外寄生虫病临床治疗。

氟雷拉纳中间体肟酸的化学名为（4-（羟基亚氨基）甲基）-2-甲基苯甲酸，CAS号：1437051-93-8分子式为C₉H₉NO₃，分子量为179.17。

目前，未见该化合物及其杂质检测方法的相关专利文献报道，随着国内对该产品的研究深入，其生产过程中产生的杂质也逐渐被发现，为了加强该氟雷拉纳中间体肟酸及其中间体、杂质的质量控制，有必要提供一种灵敏、稳定、可靠的检测方法。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种氟雷拉纳中间体肟酸的反相高效液相色谱分析方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种氟雷拉纳中间体肟酸的反相高效液相色谱分析方法，所述氟雷拉纳中间体肟酸为(4-(羟基亚氨基)甲基)-2-甲基苯甲酸，包括如下步骤：

配制标准品溶液：使用乙腈水溶液溶解所述氟雷拉纳中间体肟酸标准品；

配制待测样品溶液：使用乙腈水溶液溶解氟雷拉纳中间体肟酸待测样品；

使用反相高效液相色谱测定标准品溶液和待测样品的色谱图，所述反相高效液相色谱的条件为：流动相由流动相A和流动相B组成，其中乙腈为流动相A、磷酸溶液为流动相B，磷酸的质量浓度为0.05%～0.15%，流动相A：流动相B进行梯度洗脱；

根据标准品和待测样品的色谱图计算出待测样品的含量。

在一些实例中，所述乙腈水溶液体积浓度为40%～80%。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱中流动相的流速为0.6～1mL/min。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱的色谱柱温为20℃～35℃。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱的色谱柱为C18色谱柱：4.6×250 mm，5μm。

在一些实例中，所述磷酸溶液中，磷酸的质量浓度为0.1%。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱的检测波长为200nm～210nm。

在一些实例中，所述反相高效液相色谱的进样量为10μL～20μL。

在一些实例中，所述氟雷拉纳中间体肟酸的浓度为0.3～1mg/mL。