[发明专利]一种检测细胞色素氧化酶CYP3A的广谱型荧光探针的应用

权利要求书

1.一种检测细胞色素氧化酶CYP3A的广谱型荧光探针非疾病诊断及治疗目的的应用，其特征在于：探针底物为BN类化合物衍生物，其结构通式如下：

其中，R₁、R₂、R₃、R₄为氢；

探针的应用为：该探针底物被CYP3A特异性催化生成相应的羟化产物，探针底物与含CYP3A的生物样品混合后进行酶促反应，通过定量检测单位时间内的底物消除率或其羟化产物的生成率来定量测定不同生物体系中CYP3A的活性；具体测定方法及条件如下：

A.体系中以BN类化合物衍生物作为探针底物；底物浓度选择1/10～10K_m；

B.在PBS缓冲液中，反应温度为20℃至60℃之间；孵育体系pH介于5.5～10.5之间；

C.反应时间为5～120分钟，确保以上底物相应的羟化产物达到定量限，且底物转化率不超过20％时终止反应；

D.测定单位时间内底物减少量或羟化产物生成量，作为CYP3A活性的评价指标；

该探针底物及其羟化产物的荧光信号需采用激发波长470nm，最大发射波长为526nm。

2.根据权利要求1所述的一种检测细胞色素氧化酶CYP3A的广谱型荧光探针非疾病诊断及治疗目的的应用，其特征在于：所述生物体系为重组表达CYP3A酶、人或动物组织制备样本及其制备物中的任意一种。

3.根据权利要求1所述的一种检测细胞色素氧化酶CYP3A的广谱型荧光探针非疾病诊断及治疗目的的应用，其特征在于：该探针底物用于CYP3A可逆、不可逆抑制剂及CYP3A可逆、不可逆激活剂的快速筛选及调控能力的定量评价。

4.根据权利要求1所述的一种检测细胞色素氧化酶CYP3A的广谱型荧光探针非疾病诊断及治疗目的的应用，其特征在于：该探针底物用于CYP3A表达诱导剂的快速筛选及诱导表达能力的评价，评估代谢酶CYP3A4的个体及种属差异。

5.根据权利要求1所述的一种检测细胞色素氧化酶CYP3A的广谱型荧光探针非疾病诊断及治疗目的的应用，其特征在于：该探针底物作为实验动物在体及整体CYP3A的探针底物，评估代谢酶CYP3A的个体及种属差异。