[发明专利]一种基于磁性微球共培养的粘性物质holdfast的富集方法

权利要求书

1.一种基于磁性微球共培养的粘性物质holdfast的富集方法，其特征在于，按照如下步骤进行：

(1)使用磁性微球与新月柄杆菌共培养；

(2)使用磁力架将富集了分泌holdfast的新月柄杆菌的磁性微球与与未分泌holdfast的新月柄杆菌分离；

(3)提纯并获得holdfast。

2.根据权利要求1所述基于磁性微球共培养的粘性物质holdfast的富集方法，其特征在于，所述磁性微球内含磁性Fe₃O₄，外包材质为SiO₂，粒径40μm。

3.根据权利要求1所述基于磁性微球共培养的粘性物质holdfast的富集方法，其特征在于，所述共培养的条件为温度25-35℃、转速200-300rpm、离心力1.2-1.8g。

4.根据权利要求1所述基于磁性微球共培养的粘性物质holdfast的富集方法，其特征在于，步骤(2)所述分离方法为：将培养结束的磁性微球菌液倒入40-60mL离心管中并置于磁力架上，8-12s内匀速翻转8-12次磁力架使磁性微球吸附在磁力架一侧，打开管盖，移除管中菌液；加入40-60mL去离子水，盖上管盖，拿起离心管翻转8-12次洗涤磁性微球，再次放入磁力架，8-12s内匀速翻转8-12次磁力架使磁性微球吸附在磁力架一侧，打开管盖，移除管中液体，重复洗涤2-4次。

5.根据权利要求1所述基于磁性微球共培养的粘性物质holdfast的富集方法，其特征在于，步骤(3)所述提纯方法为：

(1)将洗涤后的磁性微球用1mL的PBS重悬，转移至1.5mL离心管中；

(2)在离心管中加入溶菌酶至终浓度为8-12mg/mL，于37℃孵育28-32min，离心移除上清；

(3)用1mL的甲醇重悬微球，于超声清洗仪中超声20-40min以使甲醇充分溶解holdfast；

(4)离心吸取上清，得到holdfast的甲醇溶液。

6.根据权利要求1所述基于磁性微球共培养的粘性物质holdfast的富集方法，其特征在于，所述PBS的pH为6.0-7.0。