[发明专利]一种牡蛎寡肽及其制备方法在审
申请号: | 202111429719.3 | 申请日: | 2021-11-29 |
公开(公告)号: | CN113957113A | 公开(公告)日: | 2022-01-21 |
发明(设计)人: | 周尽学;郭红星;黄姗 | 申请(专利权)人: | 海南华研胶原科技股份有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/16;C07K1/14 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 文小花 |
地址: | 570100 海南省海口*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 牡蛎 寡肽 及其 制备 方法 | ||
本发明提供一种牡蛎寡肽及其制备方法,包括以下步骤:S1、取牡蛎肉,加入1.8‑2.2倍质量的纯化水进行匀浆,得到牡蛎肉浆;加入体积比为2‑4:6‑8:1的乙酸乙酯、甲醇和纯化水,在40‑50℃条件下超声提取1‑2h;S2、在超声后的牡蛎肉浆中,加入质量比为1:1.2‑1.3:0.3‑0.5:0.8‑1.0的胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶的复合酶,酶解130‑150min,灭酶,得到牡蛎酶解液;S3、牡蛎酶解液先在12000‑15000xg条件下离心3‑5min后收集上清液,将上清液以在70000‑80000xg条件下离心50‑60min,得到超速离心液;S4、将超速离心液经G‑10分子筛凝胶层析处理,收集层析滤液;S5、将滤液于40‑50℃浓缩5‑8h,在‑80~‑90℃下真空冷冻干燥,得到目标牡蛎寡肽,对A549细胞抗Bap暴露导致的细胞损伤具有显著增强作用。
技术领域
本发明涉及牡蛎加工技术领域,特别涉及一种牡蛎寡肽及其制备方法。
背景技术
牡蛎,别名又叫生蚝,为牡蛎科(ostreae)动物牡蛎(ostreagigastnunb)及其近缘动物的全体,是海产贝壳。在亚热带、热带沿海都适宜蚝的养殖,我国分布很广,北起鸭绿江,南至海南岛,沿海皆可产蚝。蚝乃软体有壳,依附寄生的动物,咸淡水交界所产尤为肥美。现有以牡蛎为原料,制备牡蛎肽具有抗菌、抗疲劳、抗氧化等作用。例如许旻等采用复合酶法制备了牡蛎抗氧化肽。进一步优化牡蛎寡肽制备工艺,开发牡蛎寡肽更多功效性,提高牡蛎寡肽应用范畴,具有较大意义。
发明内容
鉴于此,本发明提出一种牡蛎寡肽及其制备方法,较大幅度增强产品功效。
本发明的技术方案是这样实现的:
一种牡蛎寡肽的制备方法,包括以下步骤:
S1、取牡蛎肉,加入1.8-2.2倍质量的纯化水进行匀浆,得到牡蛎肉浆;加入体积比为2-4:6-8:1的乙酸乙酯、甲醇和纯化水,在40-50℃条件下超声提取1-2h;
S2、在超声后的牡蛎肉浆中,加入质量比为1:1.2-1.3:0.3-0.5:0.8-1.0的胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶的复合酶,酶解130-150min,灭酶,得到牡蛎酶解液;
S3、牡蛎酶解液先在12000-15000xg条件下离心3-5min后收集上清液,将上清液以在70000-80000xg条件下离心50-60min,得到超速离心液;
S4、将超速离心液经G-10分子筛凝胶层析处理,收集层析滤液;
S5、将滤液于40-50℃浓缩5-8h,在-80~-90℃下真空冷冻干燥,得到牡蛎寡肽。
进一步,S1步骤中,所述匀浆温度为38-40℃。
进一步,S1步骤中,所述乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为3:7:1。
进一步,S1步骤中,所述乙酸乙酯、甲醇和纯化水的总质量为牡蛎肉浆质量的4-6倍。
进一步,S2步骤中,所述复合酶的添加量为牡蛎肉浆质量的0.1-0.3%。
进一步,S2步骤中,所述酶解温度为35-38℃。
进一步,S3步骤中,牡蛎酶解液先在13000xg条件下离心4min后收集上清液,将上清液以在75000xg条件下离心60min,得到超速离心液。
进一步,S5步骤中,所述冷冻干燥时间为20-28h。更进一步,所述冷冻干燥时间为24h。
一种牡蛎寡肽,由本发明任一项所述的方法制得。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
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