[发明专利]层孔菌深层发酵浓缩液与菌体提取物组合物及其制备方法、应用

权利要求书

1.一种层孔菌深层发酵浓缩液与菌体提取物组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)活化后的层孔菌菌株接种到液体培养基中，28℃第一发酵培养，得一级液体发酵种子；

2)上述一级液体发酵种子分散后，接种到新的液体培养基中第二发酵培养，第二发酵培养的温度由28℃升至30℃，得二级液体发酵种子；

3)上述二级液体发酵种子分散后，接种到新的液体培养基中第三发酵培养，第三发酵培养的温度由30℃升至32℃，发酵结束后，对三级液体发酵产物进行离心，分别收集菌体、菌体的发酵液；

4)向上述菌体中加入无菌超纯水混悬后，加入保护剂，匀浆，热裂解，过滤，收集菌体提取液；真空旋转蒸发浓缩，得菌体提取物；

5)将上述菌体的发酵液过滤除菌后，真空旋转蒸发浓缩，得深层发酵浓缩液；

6)将上述菌体提取物、上述深层发酵浓缩液混合，得组合物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

所述层孔菌包括裂蹄层孔菌、松针层孔菌中至少一种。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤1)中，第一发酵培养的时间为7d；第一发酵培养的转速为150r/min；

步骤2)中，第二发酵培养的时间为7d；第二发酵培养的转速为150r/min；

步骤3)中，第三发酵培养的时间为7d；第三发酵培养的转速为150r/min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤1)、步骤2)、步骤3)中所述液体培养基，由包括如下原料制备而得：麦芽糖15g/L、蔗糖15g/L、酵母浸粉15g/L、蛋白胨15g/L、磷酸二氢钾1g/L、七水硫酸镁0.5g/L、氯化钙0.5g/L、维生素B1 10mg/L、桦木皮发酵浸提物10mL/L、栎树皮发酵浸提物10mL/L，松树皮发酵物浸提物20mL/L。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤4)中，所述保护剂为海藻糖；

步骤4)中，无菌超纯水的加入质量为菌体的2-20倍。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤4)、步骤5)中，真空旋转蒸发浓缩的真空度为0.094-0.096Mpa。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤6)中，深层发酵浓缩液、菌体提取物的体积比为10％～90％：10％～90％；

优选的，步骤6)中，深层发酵浓缩液和菌体提取物的体积比为30％：70％。

8.权利要求1～7任一项所述的制备方法制备得到的深层发酵浓缩液与菌体提取物的组合物。

9.权利要求1～7任一项所述的深层发酵浓缩液与菌体提取物的组合物在护肤品中的应用。

10.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，

所述护肤品具有抗氧化，抗炎症，促进胶原蛋白生成，延缓皮肤衰老功能。