[发明专利]层孔菌深层发酵浓缩液与菌体提取物组合物及其制备方法、应用

说明书

本发明提出层孔菌深层发酵浓缩液与菌体提取物组合物及其制备方法、应用，属于生物护肤品技术领域。该方法包括如下步骤：1)制备一级液体发酵种子；2)制备二级液体发酵种子；3)二级液体发酵种子分散后，接种到新的液体培养基中第三发酵培养，发酵结束后，对三级液体发酵产物进行离心，分别收集菌体、菌体的发酵液；4)向上述菌体中加入无菌超纯水混悬后，加入保护剂，匀浆，热裂解，过滤，收集菌体提取液；真空旋转蒸发浓缩，得菌体提取物；5)将菌体的发酵液过滤除菌后，真空旋转蒸发浓缩，得深层发酵浓缩液；6)将菌体提取物、上述深层发酵浓缩液混合，得组合物。所得组合物具有抗氧化，抗炎症，促胶原蛋白生成，延缓皮肤衰老的作用。

技术领域

本发明属于生物护肤品技术领域，具体涉及层孔菌深层发酵浓缩液与菌体提取物组合物及其制备方法、应用。

背景技术

真菌是一类广泛分布于陆地和水体，依靠分解现有的有机物或活的动植物吸收营养物质的真核生物。自然界中的绝大多数真菌有机体是由菌丝体组成的，它们通过产生大量孢子进行有性或无性繁殖，并在适宜的条件下生长为菌丝体。随后，这些菌丝体分化成不同形状的子实体，成为自然界中可观察到的真菌类生物。

真菌具有极高的营养价值，在我国具有悠久的食用和药用价值。这是因为菌中含有大量蛋白质，并含有多种维生素、多糖和一些微量元素，对人体具有良好的药理作用。随着人们对健康和天然成分的追求，一些植物来源的具有不同药理功效的真菌逐渐被发现并被加工成产品，例如，猴头菌制成的“猴菇片”具有的抗炎功效使其可以被用来治疗慢性胃炎、胃溃疡等疾病。除此之外，研究表明真菌产生的次生代谢产物中的活性成分还具有抗肿瘤，抗氧化的药理作用，为真菌的应用开阔了前景。

药用拟层孔菌是一类多生长于树干表面，子实体木栓质至木质的植物真菌，具有祛风除湿，消肿止痛的疗效，可以用来治疗哮喘、风湿性关节炎、牙周炎和水肿等疾病，同时还具有抗肿瘤的功效。发酵工程是充分利用真菌次生代谢产物的一种生产手段，目前多种层孔菌次生代谢产物在护肤品行业中的应用价值尚未被充分发掘。

发明内容

本发明提供的高温诱导的层孔菌深层发酵浓缩液与菌体提取物组合物及其制备方法、应用，使护肤品具有抗氧化，抗炎症，促进胶原蛋白生成，延缓皮肤衰老的护肤功效。

本发明提出一种层孔菌深层发酵浓缩液与菌体提取物组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)活化后的层孔菌菌株接种到液体培养基中，28℃第一发酵培养，得一级液体发酵种子；

2)上述一级液体发酵种子分散后，接种到新的液体培养基中第二发酵培养，第二发酵培养的温度由28℃升至30℃，得二级液体发酵种子；

3)上述二级液体发酵种子分散后，接种到新的液体培养基中第三发酵培养，第三发酵培养的温度由30℃升至32℃，发酵结束后，对三级液体发酵产物进行离心，分别收集菌体、菌体的发酵液；

4)向上述菌体中加入无菌超纯水混悬后，加入保护剂，匀浆，热裂解，过滤，收集菌体提取液；真空旋转蒸发浓缩，得菌体提取物；

5)将上述菌体的发酵液过滤除菌后，真空旋转蒸发浓缩，得深层发酵浓缩液；

6)将上述菌体提取物、上述深层发酵浓缩液混合，得组合物。

进一步地，所述层孔菌包括裂蹄层孔菌、松针层孔菌中至少一种。

进一步地，步骤1)中，第一发酵培养的时间为7d；第一发酵培养的转速为150r/min；

步骤2)中，第二发酵培养的时间为7d；第二发酵培养的转速为150r/min；

步骤3)中，第三发酵培养的时间为7d；第三发酵培养的转速为150r/min。