[发明专利]敲低VAMP5基因表达的制剂在制备治疗脑胶质瘤的药物中的应用

说明书

本发明提供了敲低VAMP5基因表达的制剂在制备治疗脑胶质瘤的药物中的应用，属于生物化学及分子生物学技术领域。VAMP5基因能够作为治疗脑胶质瘤的靶点，敲低VAMP5基因表达能够治疗脑胶质瘤。经过实验证明，敲低人脑胶质瘤中的VAMP5基因后抑制了胶质瘤细胞贴壁形态的形成、细胞的增殖和迁移能力，慢病毒VAMP5敲低组相对于对照组能够使较低等级和部分高等级的脑胶质瘤细胞逐渐死亡。

技术领域

本发明属于生物化学及分子生物学技术领域，具体涉及敲低VAMP5基因表达的制剂在制备治疗脑胶质瘤的药物中的应用。

背景技术

脑胶质瘤是由于大脑或脊髓胶质细胞癌变所产生，是临床上最常见的中枢神经系统恶性肿瘤，占原发性脑肿瘤的33％～45％，恶性脑肿瘤的约80％，超过95％的病人的存活期无法超过5年，具有发病率高、复发率高、易转移、死亡率高以及治愈率低的特点。脑胶质瘤按照WHO分类，按照肿瘤恶性程度递增分为I-IV型，其中WHO IV型恶性程度最高，又称为胶质母细胞瘤 (glioblastoma multiform，GBM)。近些年来虽然在脑胶质瘤的治疗，如外科手术切除、放疗和化疗方面取得了一些进展，但整体上仍然缺乏足够的治疗手段。手术切除仍然是脑胶质瘤最有效的治疗方法，但是受制于脑胶质瘤易扩散、肿瘤与正常组织间边界不清晰的特征，手术难以切除干净因此导致了复发率高。虽然目前已有大量的脑胶质瘤基因组测序结果，但是脑胶质瘤的致病机理仍然未研究清楚，缺少用于脑胶质瘤治疗的基因靶点。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供敲低VAMP5基因表达的制剂在制备治疗脑胶质瘤的药物中的应用，VAMP5基因能够作为治疗脑胶质瘤的靶点，敲低VAMP5基因表达能够治疗脑胶质瘤。

本发明提供了敲低VAMP5基因表达的制剂在制备治疗脑胶质瘤的药物中的应用。

优选的，所述敲低VAMP5基因表达的制剂包括shRNA，shRNA敲低的VAMP5基因的mRNA靶序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明提供了一种敲低VAMP5基因表达的shRNA，包含碱基互补配对的正义链和反义链；

所述正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；

所述反义链的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；

本发明还提供了一种敲低VAMP5基因表达的重组慢病毒载体，以pHBLV-U6-MCS-ZsGreen-PGK-PURO或pHBLV-U6-MCS-PGK-PURO为骨架，插入有上述方案所述的shRNA。

优选的，所述shRNA通过U6启动子表达。

本发明还提供了一种重组慢病毒，经上述方案所述重组慢病毒载体转染细胞系，包装获得。

本发明还提供了上述方案所述的shRNA或者所述的重组慢病毒载体或所述的重组慢病毒在制备治疗脑胶质瘤的药物中的应用。

优选的，所述脑胶质瘤包括LNZ308和/或A172。

本发明还提供了一种治疗脑胶质瘤的药物，所述药物中包含上述方案所述重组慢病毒和药学上可接受的辅料。

本发明提供了敲低VAMP5基因表达的制剂在制备治疗脑胶质瘤的药物中的应用。本发明人研究发现VAMP5基因能够作为治疗脑胶质瘤的靶点，敲低VAMP5基因表达能够治疗脑胶质瘤。本发明经过试验证明，敲低人脑胶质瘤中的VAMP5基因后抑制了胶质瘤细胞贴壁形态的形成、细胞的增殖和迁移能力，慢病毒VAMP5敲低组相对于对照组(空载体病毒)能够使脑胶质瘤细胞逐渐死亡。

附图说明