[发明专利]一种CadR基因突变体、含突变体的重组载体及其应用有效
申请号: | 202111435335.2 | 申请日: | 2021-11-29 |
公开(公告)号: | CN114369606B | 公开(公告)日: | 2023-04-28 |
发明(设计)人: | 陈少鹏;蔡叶申;朱凯丽;沈亮 | 申请(专利权)人: | 中国科学院合肥物质科学研究院;皖南医学院 |
主分类号: | C12N15/31 | 分类号: | C12N15/31;C12N15/70;C12N15/65;C12N1/21;C07K14/21;G01N21/64;C12R1/19 |
代理公司: | 合肥市长远专利代理事务所(普通合伙) 34119 | 代理人: | 余婧 |
地址: | 23003*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 cadr 基因 突变体 重组 载体 及其 应用 | ||
1.一种CadR基因突变体,其特征在于,所述基因突变体的核苷酸序列为如SEQ ID NO:6所示。
2.一种含权利要求1所述的CadR基因突变体的重组载体,其特征在于,所述重组载体中还含有组成型启动子、pCadR启动子和目的基因,所述组成型启动子与权利要求1所述的CadR基因突变体可操作性地连接,且CadR基因突变体位于组成型启动子下游,所述pCadR启动子与目的基因可操作性地连接,且目的基因位于pCadR启动子下游。
3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体为双向表达重组载体;其中,所述重组载体中组成型启动子和pCadR启动子的转录方向相反。
4.根据权利要求2所述重组载体,其特征在于,所述组成型启动子为启动子J23109。
5.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体的出发载体为PSB1K3载体。
6.根据权利要求2-5任一项所述的重组载体,其特征在于,所述目的基因为报告基因;所述报告基因为GFP基因、RFP基因或者mcherry基因。
7.一种如权利要求2-6任一项所述的重组载体在以镉作为诱导剂诱导蛋白表达中的应用,或者一种如权利要求6所述的重组载体作为镉诱导型生物传感器在检测镉含量中的应用。
8.一种含有如权利要求2-6任一项所述的重组载体的工程菌。
9.一种含有如权利要求2-6任一项所述的重组载体的工程菌在以镉作为诱导剂诱导蛋白表达中的应用,或者一种含有如权利要求6所述的重组载体的工程菌作为镉诱导型生物传感器在检测镉含量中的应用。
10.一种检测镉含量的方法,其特征在于,以含有如权利要求6所述的重组载体的工程菌作为镉诱导型生物传感器进行检测,其步骤包括:
S1、以处于对数生长期的工程菌菌液作为检测菌液,将镉标准溶液加入所述检测菌液中,得到含梯度浓度镉离子的诱导体系,然后进行诱导培养,诱导培养结束后检测菌体中的荧光值,绘制标准曲线;
S2、将与镉标准溶液相同体积的待测样品溶液加入所述检测菌液中,得到诱导体系,然后进行诱导培养,诱导培养结束后检测菌体中的荧光值,根据标准曲线计算待测样品溶液中的镉含量。
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