[发明专利]一种菠菜Y染色体特异的核苷酸探针及其应用

说明书

本发明公开了一种菠菜Y染色体特异的核苷酸探针及其应用，所述核苷酸探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，该核苷酸探针的5’末端用fluorescein或Alexa Fluor‑488或Texas Red荧光基团进行标记。本发明提供的SpY‑YY_141330探针可在菠菜减数分裂相和有丝分裂相Y染色体上产生强而清晰的信号，属于一种菠菜Y染色体特异的核苷酸探针。使用这个探针进行荧光原位杂交（FISH），可以高效、稳定的鉴定菠菜减数分裂、有丝分裂相Y染色体。

技术领域

本发明属于染色体工程技术领域，具体涉及一种菠菜Y染色体特异的核苷酸探针及其应用。

背景技术

菠菜（Spinacia oleracea L.，2n=2×=12）是一种富含维生素和矿物质元素的高营养叶菜，在50多个国家栽培，并且种植面积在逐年增加，2019年全球产量为3010万吨（FAOSTAT; http://faostat.fao.org）。菠菜通常为雌雄异株植物，F1杂交种主要被用来菠菜生产，而杂交种生产母本一般为雌性系，父本为自交系，因此，阐明菠菜性别决定的分子机制是菠菜育种计划的一个重要课题。通常认为菠菜性别决定机制是XY型性别决定机制，性别是由一个具有三个复等位基因（X，X^m，Y）的位点决定，基因型XX表现为雌性植株，基因型为X^mX、X^mX^m表现为雌雄同株，而XY、X^mY基因型表现为雄性植株（Iizuka and Janick，1962），性决定基因存在于最长的一对染色体上，为同型性染色体（Deng et al.，2012；Denget al.，2013）。后来证明控制两性的基因M与Y位于Y染色体不同的位点，属于非等位基因（Yamamoto et al.，2014）。2019年，Okazaki等又认为菠菜的雌雄异株是由单因子而不是双因子系统调控的（Okazaki et al.，2019）。因此，目前菠菜性别决定分子机制是有争议的，而克隆到菠菜性别决定基因是解决该问题的关键所在，但是至今未见相关报道。