[发明专利]一种与酶共生增强炎症治疗的多肽自组装药物递送载体的制备方法

权利要求书

1.一种与酶共生增强炎症治疗的多肽自组装药物递送载体的制备方法，其特征在于，所述多肽自组装药物递送载体为DEX@AmpFQB，制备步骤如下：

步骤1：多肽AmpFQ和AmpFQ-ETGE的合成；

1)将相对于Merrifield树脂2倍当量的Boc-Phe-OH、3倍当量的K₂CO₃和3倍当量的KI溶解于DMF中并加入含有Merrifield树脂的固相合成管，在60-80℃下摇动12-16小时，依次用95％乙醇、DMF和DCM洗涤树脂，利用DCM稀释的体积百分含量为30％的TFA脱掉Boc保护基团，从而使第一个氨基酸接到树脂上；

2)之后，通过常规的Fmoc固相合成法连接剩下的FFAmpF四个氨基酸，具体操作是，将相对于Merrifield树脂4倍当量的Fmoc保护的氨基酸、4倍当量的HATU和6倍当量的DIEA溶解于DMF中与接了第一个氨基酸的树脂反应1.5小时，用25％哌啶去除Fmoc保护基团；

3)在合成FFAmpFF之后，将N-末端Fmoc-保护基团保留在树脂上，用DCM稀释的50％TFA除去4-氨基脯氨酸的Boc-保护基团；

4)随后，将相对于Merrifield树脂4倍当量的醌丙酸、4倍当量的HATU和6倍当量的DIEA溶解于DMF中加入含有接了FFAmpFF的树脂的合成管中并反应1.5小时，接着用25％哌啶去除FFAmpQFF的N-末端Fmoc保护基团；

5)对于多肽AmpFQ-ETGE，通过常规Fmoc固相合成法连接相应的序列或功能部分；最后，使用体积比为35：6：9的TFA，茴香硫醚和TMSOTF组成的切割剂将多肽从树脂上裂解下来；

步骤2：通过将AmpFQ和AmpFQ-ETGE共组装制备AmpFQB；

首先将多肽AmpFQ和AmpFQ-ETGE冻干粉分别用pH为7.4的PBS缓冲液溶解制备得到浓度均为5mM的AmpFQ和AmpFQ-ETGE的多肽母液；通过90:10的体积比混合多肽AmpFQ的母液和多肽AmpFQ-ETGE的母液制备得到浓度为5mM的AmpFQB的母液；

步骤3：通过溶剂蒸发法制备DEX@AmpFQB；

将浓度均为5mM的DEX与AmpFQB按照摩尔比1：1分别溶解在HFIP中，然后在离心管中混合，在室温下用吹风机除去HFIP；然后，将离心管中剩余的DEX与AmpFQB粉末重新溶解在水中，通过离心去除沉淀物，从而制备得到了多肽浓度为5mM的DEX@AmpFQB。