[发明专利]一种低分子人表皮细胞自噬调控肽DKX-9及其应用

说明书

本发明提供了一种低分子人表皮细胞自噬调控肽DKX‑9及其应用，根据通用细胞自噬调控机制及其理论，新设计与合成的一种可调控人体表皮细胞自噬活性和效应提升的小分子人工合成肽。本发明的低分子人表皮细胞自噬调控肽DKX‑9采用五类氨基酸(苏氨酸、脯氨酸、酪氨酸、天冬酰胺和精氨酸)共9个氨基酸组成的肽序列，其氨基酸组成及其序列是SEQ ID No.1:TPYNRRRRY‑NH2。经将其对人永生化表皮细胞(HaCat)应用，证实其可上调正向自噬相关蛋白Beclin‑1、LC3‑II、LAMP1、TFEB的表达水平、并可下调负向自噬相关蛋白p62的表达水平。本发明的自噬调控肽DKX‑9未来对皮肤老化干预及防治某些皮肤病等具有积极意义和医学价值，且对推动或促进合成肽未来在细胞自噬等相关学科研发与应用发挥重要作用。

技术领域

本发明属于生物工程技术与精细化工及皮肤抗衰老美容化妆品交叉学科领域，具体涉及 细胞自噬调控肽范畴，尤其是涉及一种低分子人表皮细胞自噬调控肽DKX-9及其应用。

背景技术

人体皮肤表皮层组织和细胞，不仅可通过表皮屏障保护人体免受外界的侵害，而且，还 可通过阻止皮肤组织水分挥发的保水或保湿作用机制等发挥延缓皮肤组织衰老的作用。皮肤 表皮组织的屏障构建和皮肤表皮组织的保湿抗衰老这两个方面的作用对于机体生存与组织保 护来说都至关重要、也必不可少。皮肤组织细胞与人体其它细胞类型一样，随着时间延续和 机体年龄增长也会发生结构、组方、功能等衰老和衰退，且诸多代谢废物及失活、老化细胞 及亚细胞结构不能有效地被清除，生理性细胞常态和稳态不断失衡加速皮肤老化和皮肤疾病。

细胞自噬能有效降解和清除皮肤组织及其细胞内老化变性或变异的蛋白、合成差错和突 变的核酸、以及受损、无用的细胞亚结构及细胞器，并将其降解的蛋白、核酸和细胞器资源 再次循环利用于细胞生存、生长、增殖、分化、再生和修复等细胞生物学过程。因此维持正 常的自噬功能能延续机体寿命相关。最近线虫中发现了自噬与长寿的相关性，这更是为自噬 和衰老的关系提供了相应的基因学证据。而表皮细胞的自噬效应在皮肤生理学方面具有重要 作用，对于维持皮肤表皮组织细胞的正常结构状态(常态)、细胞稳定状态(稳态)和代谢 平衡状态(衡态)等正常结构和功能等发挥着重要的影响和作用。这些作用的重要部分正是 通过人体皮肤表皮细胞的自噬效应能够主动消化、降解已变性或变异的代谢蛋白及其聚合体、 以及受损或老化的细胞器(如线粒体、高尔基体、内质网等)和基因突变的细胞核及其DNA 等作用效应实现的，尤其是对于人体表皮角质形成细胞的正确终末分化有极其重要的意义。 而且，现代细胞学研究也证实，表皮细胞自噬在表皮颗粒层的终末分化过程中也起到了重要 的作用。另外，目前还有研究也认为，表皮细胞的核滞留与自噬功能被破坏有很大的关系， 也是导致皮肤老化和某些皮肤疾病特征性改变的重要原因之一。

细胞自噬对维持皮肤组织正常代谢平衡至关重要。细胞的自噬作用如果受到严重破坏， 所带来的皮肤组织生物学后果是表皮细胞增殖能力降低，而表皮细胞增殖能力也是上皮干细 胞最重要的特征功能之一。然而，随着年龄增长，细胞自噬活性通常会呈下降趋势，这种随 增龄逐渐衰减的自噬作用对表皮细胞结构和功能的影响具有重要意义。特别是，目前医学美 容术中“去死皮”“化学换肤”或“美白祛斑”等手段采用某些表皮化学腐蚀剂或剥脱剂(如 羟基酸、果酸、维甲酸、三氯乙酸等)、物理磨削术、激光术、电灼术、冷冻术等广泛应用 或滥用等，造成了人体皮肤表皮层理化损伤、正常皮肤屏障结构和功能被破坏、表皮组织变 薄及角质层含水量减少及皮肤严重老化等。

HaCaT细胞是人类永生化表皮细胞，是非肿瘤来源的人体正常皮肤永生化角质形成细胞 株，与正常人角质形成细胞分化特性相似，具有很强的增殖、生长、分化的能力。因此，为 了防止人体皮肤损伤，防止正常皮肤屏障结构和功能被破坏，防止表皮组织变薄及角质层含 水量减少及防止皮肤严重老化，开发更为高效，特异性的人表皮细胞自噬调控肽，对促进或 推动皮肤抗老化和干预及防治某些皮肤疾病等无疑具有积极意义和医学价值，而且对于推动 或促进人工合成多肽在细胞自噬及其相关学科领域的研制和应用起到重要作用。

发明内容